首先,我们需要考虑目的蛋白的大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上,因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参,由于β-Actin的检测分子量大约在42kD,因此该内参抗体不是很适合 用于检测38kD-48kD大小目标蛋白的WB实验中。另外,虽然β-...
在定量PCR实验中,ACTIN常被用作内参基因,用来对样本中目标基因的表达进行标准化。如果ACTIN的Ct值很高,说明其在样本中的表达量较低,可能有如下原因:1、样本处理方式不当:如果分离RNA或者反转录RNA时处理不当,可能会导致部分RNA质量下降,从而影响内参基因ACTIN的表达。2、其他污染物影响:如果样本中...
人源内参基因(B-actin)荧光PCR试剂盒参考价 ¥1600-¥2800/盒 具体成交价以合同协议为准 公司名称 上海晅科生物科技有限公司 品牌其他品牌 型号 所在地上海市 厂商性质生产厂家 更新时间2024/10/17 14:43:44 访问次数 179 产品标签 人源内参基因核酸检测荧光PCR检测试剂盒B-actin荧光定量PCR试剂盒 在线交流 ...
网友 1 最佳答案 回答者:网友 1,首先需要根据三个目标基因及Actin的序列设计四对引物,引物设计原则同普通PCR引物,网上有很多介绍的,最好其中一个引物是结构基因部分序列+内含子部分序列这种模式。序列长一些25++,退火温度高一些(一般检测时常会60℃附近做两步法扩增),尽量选择错配情况少的引物组合。许多软件,如pri...
mirna的荧光定量pcr可以用actin做内参 miRNA通过与转录本的相互作用,关闭或抑制基因的表达。 最近的研究表明它们影响了约三成的基因。 miRNA在多个组织中差异表达,这就让表达图谱分析成为研究的重点。 同时,miRNA的过表达和抑制也是近年来常用的研究方法。
在实时荧光定量PCR中,内参基因用于标准化反应物中的样本RNA/DNA的数量,以消除可能的样本间差异和批次...
3. beta-actin(细胞骨架蛋白)就是这样一种管家基因,它是细胞骨架微丝的基本构成单位,在各种细胞中表达一般恒定而较少变化,所以常用作RT-PCR等的内参。比较各组目的产物与其内参的比值就是相对定量啊。 real-time PCR实验中要求有内参作为参照,内参基因通常选择持家基因,如β- actin是较常用的内参基因,因为它在各种...
我想做PCR内参选beta-actin还是GAPDH好 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD。一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 b
之所以用actin 作内参,是因为它是持家基因,即使在不同处理下不同时间点在组织中表达量也应该是一致的...
1.把你的引物blast看看引物的目标条带是否特异;2.设置空白试验组查看实验环境是否存在污染;3.做实验...