来源于第一步中端粒酶介导的延伸产物的PCR产物含有端粒酶特异性六核苷酸增量,而内标(IS)产生216-bp的PCR产物。 步骤2:ELISA检测 将PCR产物分成两等份,变性,分别与地高辛-(DIG)标记的检测探针杂交,所述探针分别对端粒重复序列(P3-T)和内标(IS)(P3-Std), 具有特异性。通过生物素标记将所得产物固定到涂有链霉亲和...
摘要:本文介绍了一种用于检测细胞端粒酶活性的实验方法——PCR-Elisa法。该方法可用于研究端粒酶在细胞老化和癌症等疾病中的作用,对相关疾病的诊断和治疗有重要的指导意义。 关键词:端粒酶活性检测,细胞端粒酶活性实验,PCR-Elisa法 一、引言 端粒酶是一种存在于真核细胞中的酶,具有维持染色体末端端粒稳定的作用。端粒酶...
PCR-ELISA检测技术利用PCR扩增端粒酶活性产生的特定序列，并通过ELISA方法检测这些序列的存在，以评估端粒酶活性。步骤1: 延伸/扩增端粒酶将端粒重复序列（TTAGGG）添加到标记有生物素的合成P1-TS引物的3'端。使用P1-TS和锚定引物P2进行PCR扩增，扩增产物包括端粒酶介导的特异性序列和内标（IS）。步骤2: ELI...
PCR-ELISA端粒酶检测法 PCR-ELISA端粒酶检测法 发布日期:2007-6-27 热门指数:782 收藏 端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构，端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列，这一序列在生物进化中有高度的保守性（人重复序列为TTAGGG）。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合（如染色体末端融合...
PCR-ELISA端粒酶检测法PCR-ELISA端粒酶检测法 发布日期:2007-6-27 热门指数:782 收藏 端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒 DNA是一系列重复的富含 G的 DNA 序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为 TTAGGG)。已确认端粒...
检测端粒酶活性的PCR.ELISA方法的建立 祝怀平’凌斌.j戴海明’吴奎吴竞生 摘要目的建L种更为敏’喜,特异的端粒酶榆测方法. 方法特分子生物’学和免疫学方法有机地结台起来,建立 PcR—ELJsA力法并检测多种肿埔细胞株和部分组织中端粒 酶活性.结果I≮|HHIS方法能够敏感地检测出肿瘤细 ...
PCR-ELISA肿瘤标记目的:研究胃癌组织及相应癌旁组织中的端粒酶活性 ,探讨其作为胃癌肿瘤标记物的可能性。方法 :采用PCR -ELISA方法检测 36例胃癌组织及 36例相应癌旁组织中端粒酶活性的表达。结果 :36例胃癌组织中 ,30例端粒酶呈阳性 ,阳性率为 83 3% ;而 36例癌旁组织中只有 1例阳性。结论 :端粒酶是特异性...
杂交产物通过ELISA进行测定.PCR-PAGE法是将端粒重复序列PCR产物直接进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,通过硝酸银染色测定端粒酶活性.结果:在端粒酶PCR-ELISA方法检测中,PCR在25~35次循环之间,吸光度A值与循环次数呈线性关系,35~45次循环已达到平台期.PCR-ELISA法检测显示HL-60、K562、Raji细胞均表达高水平的端粒酶活性,吸光度A...
宝灵曼公司最近推出了一种端粒酶PCR ELISA,它能对培养细胞或其他生物样品的细胞提取物中的端粒酶活性作高度灵敏的定性检测。 端粒是真核细胞染色体末端的特殊DNA-蛋白质结构,端粒DNA的特点是含有大量串连重复并富含G的重复序列,这些序列在进化中是高度保守的。端粒被认为可以阻止基因组DNA被降解或发生有害的重组,如:末...
方法 应用PCR-ELISA法检测53例膀胱肿瘤患者尿液脱落细胞端粒酶活性。结果 非膀胱肿瘤和膀胱肿瘤患者尿液脱落细胞端粒酶活性阳性率分别为64.15%(34/53)和7.69%(2/26),健康对照者7例均为阴性,膀胱肿瘤患者与正常人及非膀胱肿瘤患者的端粒酶活... 查看全部>> ...