荧光定量PCR(Real-time PCR),是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团,通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 以探针法荧光定量PCR为例:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针两端分别标记一个报告...
一、荧光定量PCR的原理 荧光定量PCR是一种基于聚合酶链反应(PCR)的扩增技术。它在PCR反应过程中利用荧光染料或标记物(如SYBR Green I或探针)与PCR产物结合,通过检测荧光信号的强度来定量分析初始模板的数量。 荧光定量PCR基本步骤如下: 1. DNA/RNA样本的提取和纯化; 2.反转录(如果需要检测RNA)和前处理步骤; 3....
半定量PCR半定量PCR 试剂 TrizolTMReagent (Invitrogen, USA) oligo(dT)16,RT-PCR试剂盒(Invitrogen, USA) Taq酶(Invitrogen, USA) 仪器 PCR仪 方法 一、Trizol法提取细胞总RNA 1.取200mg组织,放到1.5mlEP管中,加入1mlTrizol剪碎。 2.震荡30s。 3.加0.2ml氯仿,剧烈摇动30s,室温3min。 4. 12000×g,4℃...
猪圆环病毒多重PCR诊断方法的建立 维普资讯 http://www.cqvip.com