本实用新型公开了一种PCR基因扩增仪的模块热均衡装置,包括主机,由导热材料制成的模块,设于模块下表面上的若干块加热制冷芯片,设于模块上表面上的N个试管孔槽,设于模块内的至少一个温度传感器,设于模块边缘的环形加热丝和设于模块上表面上方的模块罩;模块罩上设有N个分别与各个试管孔槽相对应的开孔,主机分别与...
荧光定量PCR(Real-time PCR),是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团,通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 以探针法荧光定量PCR为例:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针两端分别标记一个报告...
目的 建立逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测白血病细胞血管内皮生长因子(VEGF)异构体及其受体基因的方法。方法 用TRIZOL试剂提取体外培养的细胞系总RNA,M—MLV逆转录酶生成模板cDNA,PCR扩增VEGF异构体基因以及VEGF受体Flt-1基因,扩增产物用含溴化乙锭的2%琼脂糖凝胶电泳后,直接分析电泳结果。结果 白血病细胞(K562和HL-60...
一、荧光定量PCR的原理 荧光定量PCR是一种基于聚合酶链反应(PCR)的扩增技术。它在PCR反应过程中利用荧光染料或标记物(如SYBR Green I或探针)与PCR产物结合,通过检测荧光信号的强度来定量分析初始模板的数量。 荧光定量PCR基本步骤如下: 1. DNA/RNA样本的提取和纯化; 2.反转录(如果需要检测RNA)和前处理步骤; 3....
半定量PCR半定量PCR 试剂 TrizolTMReagent (Invitrogen, USA) oligo(dT)16,RT-PCR试剂盒(Invitrogen, USA) Taq酶(Invitrogen, USA) 仪器 PCR仪 方法 一、Trizol法提取细胞总RNA 1.取200mg组织,放到1.5mlEP管中,加入1mlTrizol剪碎。 2.震荡30s。 3.加0.2ml氯仿,剧烈摇动30s,室温3min。 4. 12000×g,4℃...