(1) 生成双链DNA中的特异序列作为探针;(2) 由少量mRNA生成cDNA文库;(3) 从cDNA中克隆某些基因;(4) 生成大量DNA以进行序列测定;(5) 突变的分析;(6) 染色体步移;(7) RAPD、AFLP、RFLP等DNA多态性分析等。二、试剂准备 1. DNA模板 2. 对应目的基因的特异引物(也可能是随机序列组成的6mer脱氧核糖核酸...
一般情况下 37 ℃ 2~3 h 就可以酶解完产物,但在 PCR-RFLP 分析中宜采用酶解 4 h 或过夜。 ⑥ RFLP 酶解片段在进行电泳分离的过程中,要根据片段的大小选择不同的琼脂糖浓度。因酶切可能产生小于 100 bp 的片段,所以琼脂糖的浓度应比一般电泳时的浓度高,大约...
(6)染色体步移; (7) RAPD、AFLP、RFLP 等 DNA 多态性分析等。 一、试剂准备 1. DNA 模版 2.对应目的基因的特异引物 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含 dATP、dCTP、dGTP、dTTP 各 2mM 5.Taq 酶 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌 0.5ml 离心管中。 10×PCR buffer 5 μl d...
通过通用PCR方法检测临床标本的检验方法,使用通用PCR扩增沙眼衣原体相对保守的基因区,扩增产物用限制性内切酶处理作RFLP分析,能够区分不同型别,许多研究都已表明,PCR较培养法和酶联免疫分析法(ElA)都要敏感,而且PCR对于有症状或无症状人群同样敏感 (3)对非典型分枝杆菌基因型别、物种鉴定的应用非典型分枝杆菌生长缓慢或...
操作过程中注意事项 实验结果分析 医学遗传学教研室 医学遗传学教研室 Department of Medical Genetics Department of Medical Genetics 1 实验报告:PCR-RFLP的实验步骤和电泳结果 以简图形式写/画在试验报告上。 2 PCR-RFLP进行致病基因连锁分析技术的基本 原理是什么? 3 进行PCR-RFLP致病基因连锁分析时需要注意 哪些...
注意事项:切胶时应快速操作,在紫外灯下时间长容易伤害到眼睛;溴化乙锭染色后的DNA易受紫外光破坏,故尽量放置于暗室,切带时应使用长波长紫外灯,切胶时间尽量短。胶块一定要充分融化,否则将会严重影响DNA的回收率。把洗脱液加热,使用时有利于提高洗脱液效率。【思考题】1、如何有效提高凝胶纯化...
技术咨询电话: 010-82898320-820 联系人: 孙明 乔明明 E-mail: pcr@anheal. com 猪应激基因 PCR-RFLP 检测试剂盒 用途 猪应激基因的聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析检测试剂盒用于检测猪血凝块中的氟烷基因(Hal), 适用于猪应激基因(氟烷基因) 的检测。 原理 提取 DNA 作为模板, 高温使模板的一条双...
•实验室秩序(时间,物品保管,工作服,分组与值日)•仪器与设备的使用•实验室安全环保 实验二apoB基因多态性分析--PCR产物电泳检测 电泳的概念 带电粒子(胶体颗粒、离子等)在电场 的作用下在特定的介质中向与其电荷性质相反 的电极方向定向泳动的现象。广泛应用于生物大分子的分离和鉴定 实验室...