ABO基因中几个碱基的替换、单碱基缺失导致A、B、O三种等位基因的产生,可使红细胞膜表面带有不同抗原,进而形成四种血型表型。 在汉斯出版社《生物医学》期刊中,有论文研究根据三种等位基因关键位点的不同,采用PCR-RFLP方法扩增DNA片段并进行特异性酶切,根据酶切结果可以初步判断基因型,再通过测序的方法验证酶切结果。
PCRRFLP技术是一种结合聚合酶链反应与限制性片段长度多态性的分析方法。以下是关于PCRRFLP技术的详细概述:1. 基本原理: PCRRFLP技术通过设计特定的PCR引物对目标DNA序列进行扩增。 由于目标区域的碱基变异、插入或缺失相对较少,直接观察多态性通常较为困难。因此,扩增后的PCR产物需要经过酶切处理,利用限...
聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法是采用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的DNA片段,然后将待检测的DNA片段用限制性内切酶酶切,限制性内切酶识别并切割特异的序列,然后将酶切后的产物进行电泳,再由限制酶图谱(restriction map)分析此段序列的特异切位点,藉由片段的多样性来比对不同来源...
PCR-RFLP 基因分型方法;概念;概念;概念;基因序列查找;;基因序列查找;基因序列查找;引物设计;引物一般原则;引物一般原则;引物一般原则;PCR-RFLP 引物特殊要求;引物设计;引物设计;Primer Premier 5.0;Primer Premier 5.0;Primer Premier 5.0;Primer Premier 5.0;Primer Premier 5.0;Primer Premier 5.0;Primer Premier 5.0...
是指由限制性酶切位点间的插入﹑缺失﹑重排或点突变所引起的基因型间限制性片段长度的变异。PCR-RFLP:是在PCR和DNA序列分析基础上产生的RFLP技术。该方法是通过PCR扩增一段DNA片段,然后再选择适当的限制性内切酶,消化PCR产物,经电泳,可得到有特异性的电泳谱带,从而达到鉴定不同基因型的目的。概念 概念 Stepby...
1、PCR-RFLP 基因分型方法基因分型方法-关于序列查找、引物设计和酶切位点分析概念聚合酶链式反响衔接的限制性片段长度多态性分析 限制性片段长度多态性(restrition fragment length polymophism,RFLP): 是指由限制性酶切位点间的插入缺失重排或点突变所引起的基因型间限制性片段长度的变异。 PCR-RFLP: 是在 PCR...
【题目】点突变检测:如果点突变改变限制性酶切位点,则可以采用PCR-RFLP方法;如果点突变不改变限制性内切酶位点,则可采用ASO方法。PCR-RFLP法:例如一常染色体显性遗传型掌跖角化症家系患者是由于KRT9基因的第544位碱基C被T所替代。分析改变的突变序列发现,该突变使该基因的第541-546位序列由"5'-GAACTC-3'"变为"...
PCR-RFLP方法鉴定ABO血型基因型 ABO血型系统是人类最早发现的一种血型分类系统,在临床上具有重要意义。ABO基 因中几个碱基的替换、单碱基缺失导致A、B、O三种等位基因的产生,可使红细胞膜表面 带有丌同抗原,迚而形成四种血型表型。 在汉斯出版社《生物医学》期刊中,有论文研究根据三种等位基因关键位点的丌同,采 用...
法,血液遗传标记选择法,CK血清水平测定法 和DNA诊断法L4j.目前普遍应用的是PCR— RFLP法,因为该方法精确,样品来源广泛(猪 毛,血液,肌肉,耳组织等均可),而且所需的样 品量极少. 1材料与方法 1.1试验动物 二种核心群种猪112头,其中加系长白16 头,丹系长白7头,加系大白25头,丹系长白公 猪18头,加系长白公...
PCR-RFLP法 1)提取细胞总DNA 方法同前。 2)PCR扩增引物的设计 1.引物长度一般为15~30bp,G+C含量应在45%~55%之间。 2.应避免连续出现4个以上的单一碱基。 3.不能含有自身互补序列。 4.两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基,不然会形成引物二聚体。