5、镁离子(Mg2+) 6、缓冲液 推荐内容 一、PCR基础背景知识 聚合酶链式反应,又称为PCR,是众所周知的分子生物学技术之一。 PCR是一种能够在短时间内将单个DNA分子扩增数百万倍的生化过程。 其扩增过程包括三个连续步骤: (1) 变性,对双链DNA模板进行加热,使其解离; (2) 退火,被称为引物的短DNA分子与目标DNA...
百度试题 结果1 题目在PCR反应中,Mg2+离子的作用是什么? A. 作为DNA聚合酶的辅助因子 B. 提供DNA聚合酶的结合位点 C. 促进DNA链的延伸 D. 稳定DNA双链结构 相关知识点: 试题来源: 解析 A 反馈 收藏
(1)干扰核酸提取过程中的细胞裂解:抑制物质会致细胞裂解不完全,核酸不能有效释放,影响PCR的扩增。 (2)热稳定的DNA聚合酶的失活:环境样本中常见的抑制物腐殖化合物,可通过对Mg2+的鳌合作用从而抑制聚合酶活性。 (3)抑制物对核酸的降解和包裹:细胞中存在的核酸酶、细菌...
铵离子(NH4+) 具有去稳定作用,尤其对于错配引物-模板复合物碱基对之间的弱氢键,因此可增强反应特异性 Mg2+ 浓度过低会降低聚合酶活性,导致PCR产物较少或无PCR产物。另一方面, Mg2+ 浓度过高则会提高引物-模板复合物的稳定性,产生非特异性PCR产物,并增加由dNTP错误插入导致的复制错误。 由于NH4+ 与Mg2+具有拮抗效...
百度试题 结果1 题目PCR反应体系中,Mg2+离子的作用是什么? A. 稳定DNA聚合酶 B. 作为DNA聚合酶的底物 C. 作为DNA聚合酶的辅酶 D. 促进DNA模板的解旋 相关知识点: 试题来源: 解析 A 反馈 收藏
PCR技术是一种重要的分子生物学技术，可以在体外迅速扩增特定的DNA片段。PCR反应的成功与否，主要取决于五个要素：引物、酶、dNTP、模板DNA和Mg2+ 引物设计：1. 根据目标序列设计引物，引物的长度应为15-30bp，常用长度为约20bp。2. 引物的GC含量应在40-60%之间，避免过低或过高的GC含量。3. 引物的碱基组成应...
1 PCR PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，体系中加入dNTP、Mg2+以及延伸因子、扩增增强因子，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程，能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。图1. PCR扩增流程 2 ...
7)EDTA:金属离子螯合剂,能够螯合体系中的Mg2+,抑制聚合酶活性。0.5mM可使PCR产物减少,1mM完全没有PCR产物 8)血红素:血红素属于高等动物的红色素,是血红蛋白的辅基,存在于高等动物的血液、肝脏与肌肉的色蛋白中。大于1mg/ml抑制PCR反应。有机溶剂法提取DNA的不好除去,易残留。
百度试题 结果1 题目简答PCR体系中Mg2+的主要作用。相关知识点: 试题来源: 解析 答:对Taq DNA聚合酶进行热激活。反馈 收藏
Mg2+(终浓度) 1～3mmol/L 补加双蒸水 100 μl 其中dNTP、引物、模板DNA、Taq DNA聚合酶以及Mg2+的加量(或浓度)可根据实验调整,以上数据仅供大致参考值。 2.PCR反应五要素: 引物:(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)引物有多种设计方法,由PCR在实验...