5. 如果前面的几项都没有太大的问题的话。最后我们看看最重要的结果,也就是目的基因的变化情况了。在内参与对照组选择没错的情况下,点击 gene expression 选项,选中你想查看的样品孔的基因表达情况。 好了,这次的 RT-PCR 看图分析就到这里。最后需要注意的是图中的...
5. 如果前面的几项都没有太大的问题的话。最后我们看看最重要的结果,也就是目的基因的变化情况了。在内参与对照组选择没错的情况下,点击 gene expression 选项,选中你想查看的样品孔的基因表达情况。 好了,这次的 RT-PCR 看图分析就到这里。最后需要注意的是图中的结果还需要输出进行后续的自行运算得出结果。图...
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别急,让我慢慢跟你介绍,看完后你就能准确的分析出你的 RT-PCR 结果了。(这里以 7500 软件为例进行介绍) 1. 首先设置好内参和对照组(在 Analysis Settings 处),一般我们在上机前会对应设置好的,如果设置好的话可以直接跳至第 3 点。如果没有设置好的话是需要重新进行设置。
1、首先我们看一下PCR正常扩增曲线,是比较平滑的S型曲线,见下图: 2、常见异常结果分析 2.1 案例1 2.1.1现象:常见单基因翘尾且出现较大的Ct值和单基因翘尾无Ct值现象,见下图: 2.1.2 常见原因:阴性质控曲线翘尾,存在阳性质控或阳性标本污染;样本曲线翘尾,表示目的基因浓度低或者存在非特异性扩增或者存在污染。
这是结果图 最右侧模板是 我做的一个测序正确的重组质粒 这是酶切的图 我当时情绪有点激动,因为老师一直在质疑我根本不懂pcr原理,但pcr只是我实验的一小部分,我做好了被刁难我实验缺陷的一切准备,我没想过会揪住这里不放,我人都傻了,后来老师骂了我十分钟后,以后的人答辩他一直玩手机也没抬过头。 我觉得...
教你怎么看PCR 结果图 这是啥?怎么看? 别急,让我慢慢跟你介绍,看完后你就能准确的分析出你的 RT-PCR 结果了。(这里以 7500 软件为例进行介绍) 1. 首先设置好内参和对照组(在 Analysis Settings 处),一般我们在上机前会对应设置好的,如果设置好的话可以直接跳至第 3 点。如果没有设置好的话是需要重新...
1. PCR反应的缓冲液提供合适的酸碱度与某些离子 。 2.镁离子浓度总量应比dNTPs的浓度高,常用1.5 mmol/L。 3.底物浓度dNTP以等摩尔浓度配制,20～200 umol/L。 4. TaqDNA聚合酶2.5U(100 ul)。 5.引物 浓度一般为0.1～0.5 umol/L。 6.反应温度 ...
我们以这副很丑的图为例，第五条泳道是marker，用来指示DNA大小，电泳必跑，如果PCR产物大小对了，有...