Ct值由基线和阈值计算得来,所以他们的值对结果影响很大。软件会给出1个默认的基线和阈值,但不一定是最合适的,需要我们进行手动调整。 首先进行基线的调整。 一般范围是循环数3～15,使得靶基因的扩增信号大于背景噪声。出现不正常的扩增曲线,通常是因为设置了不正常的基线,需要对单个孔进行设置。