在设置退火温度：1、低于估算的Tm5℃作为起始的退火温度，以2℃为增量，逐步提高退火温度。2、较高的退火温度会减少引物二聚体和非特异性产物的形成。3、为获得最佳结果，两个引物应具有近似的Tm值。4、如果两个引物Tm不同，将退火温度设定为比最低的Tm低5℃。5、为了提高特异性，可以在根据较高Tm...
不同的PCR MIX所设置的退火温度是不一样的,有的比最低Tm值低5℃,有的低3℃,请你参考你所买的PCR MIX的说明书,上面肯定有详细说明。 一般PCR比最低Tm值低1-5℃,都没什么问题。 RT-PCR的文献上,有推荐的设计软件,也有推荐的PCR MIX,跟着说明书做就没有问题了。 分析总结。 不同的pcrmix所设置的退火温...
设一个高的退火温度,设一个低的退火温度,然后会自动计算出中间每排孔的退火温来自度,你只要用最低和...
设一个高的退火温度,设一个低的退火温度,然后会自动计算出中间每排孔的退火温度,你只要用最低和最高的那两个就够了.可以打EPPENDORF的技术支持电话问具体怎么操作.
一般按照Tm较低的引物来算 3. 如果没有的到特异性扩增的话，最好用梯度PCR，设置梯度Tm值试一下 ...
精华评论 bolysu 按低的那个设,比他们都低就行,可能特异性不好,但肯定能P出来, 咸鱼~翻身 设置梯度嘛,2度一个梯度。 9 ‹‹ 1 2猜你喜欢板块导航 网络生活 资源共享 化学化工 专业学科 科研生活 生物医药 材料 计算模拟 学术交流 出国留学 注册执考 24小时热帖 换一批 导师卡...
3楼:Originally posted bycoco1230at 2018-05-28 13:51:53 我就是直接设置65度退火，稀释倍数的话50...
请问：我的前引物Tm值62，后引物Tm 80,要怎么设置退火温度呢？渴望你的帮助。
一般按照Tm较低的引物来算 3. 如果没有的到特异性扩增的话，最好用梯度PCR，设置梯度Tm值试一下 ...
一般按照Tm较低的引物来算 3. 如果没有的到特异性扩增的话，最好用梯度PCR，设置梯度Tm值试一下 ...