高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)是一种基于单核苷酸熔解温度不同而形成不同形态熔解曲线的基因分析新技术,具有极高的敏感性,可以检测出单个碱基的差异。 作为一种高效稳健的"post-PCR"…
荧光定量PCR仪的校准、光源强度、温度控制精度等 都可能影响熔解曲线的准确性。因此,需要定期对仪器进行维护和校准,确保仪器的正常运行。 总而言之,熔解曲线杂乱无章并非偶然现象,而是多种因素共同作用的结果。只有深入了解影响熔解曲线的主要因素,并采取相应的措施进行优化,才能获得可靠的实验结果。 除了上...
熔解曲线分 析是定量PCR仪配套软件中的分析步骤。请根据仪器供应商的介绍进 行操作。一般而言,应当在65°C~95°C之间获取熔解曲线数据。引物 二聚体的形成与引物设计及模板的拷贝数有关。由于引物二聚体的熔解 温度较低,所以很容易与特异的产物区分开来。 6.可选:加入数据获取步骤后重复以前的循环。 为了消除由...
扩增曲线 是指实时荧光PCR扩增过程中,对整个PCR反应扩增过程进行实时的检测和连续地分析扩增相关荧光信号,随着反应时间的进行,监测到的荧光信号的变化能够绘制成一条以循环数为横坐标,以PCR反应过程中实时荧光信号强度作为纵坐标的曲线。 荧光阈值 是指在实时荧光定量PCR扩增曲线上,人为的设定一个值,它可以设定在指数扩...
大同市第四人民医院现开展的荧光PCR探针熔解曲线分析技术(MeltPro? TB结核病一体化检测系统),可以在3个小时内实现对结核分枝杆菌的利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇、氟喹诺酮和注射类二线药物耐药突变检测,具有检测覆盖位点多,检测速度快(2-3小时出结果)、检测效果好(灵敏度高、特异性强)、全程自动化,而且无任何...
荧光定量PCR／熔解曲线分析法快速鉴定葡萄球菌菌种
高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)是一种基于单核苷酸熔解温度不同而形成不同形态熔解曲线的基因分析新技术,具有极高的敏感性,可以检测出单个碱基的差异。 作为一种高效稳健的"post-PCR"技术,它不受突变碱基位置与类型的限制,无需序列特异性探针,在PCR结束后直接运行高分辨熔解即可完成对样品的分析。HRM...
1、为了消除检测多个靶标的多重pcr体系中荧光探针对pcr扩增的影响,提高检测的灵敏度和准确度,本申请提供一种单管检测多靶标的多重pcr熔解曲线分析方法、试剂盒及应用。 2、本申请提供如下技术方案: 3、第一方面,本申请提供一种单管检测多靶标的多重pcr熔解曲线分析方法,其包括: ...
本技术涉及基因检测领域,更具体地说,它涉及一种用于多种靶基因检测的多重pcr熔解曲线分析方法、试剂盒及其应用。 背景技术: 1、随着生物技术的发展,核酸检测技术已经广泛应用于众多方面,包括snp检测、hla分型、分型和耐药性检测、疾病诊断与个体用药、病原体微生物的鉴定等。通常从样品中提取的核酸不足以用于核酸检...