2) 各个区域实验用品专用:各个区域实验设备和物品应有明确的标记,不能混用。 3) 实验场所要保持通风良好,严格监测各个工作区的温湿度。 4)注意实验室污染的预防。 整个PCR 实验的操作都需要特别注意避免污染,来自样本的、试剂的以及实验室各种气溶胶,要始终保持「无核酸观念」...
将反应液放入T100梯度PCR仪 第四步:qPCR 我们可以根据试剂说明书上配置qPCR反应液的相应组分按比例配置qPCR反应液 按需稀释cDNA(一般为10倍) 第五步:点板 将配置好的引物和cDNA按照相应比例加入八联管,等待上机测试 第六步:LightCycler96上机操作 点击Eject,释放样本装载模板 将八联管在离心机中离心,排除气泡及贴壁...
1μl加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2、调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,最后在72℃ 保温7min。 3、结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃...
操作步骤:匀浆处理a、植物组织以叶片RNA提取为例.取新鲜叶片在液氮中充分研磨或将叶片剪碎后直接在Trizol中研磨,研磨要迅速,最好不要超过1min.,大约100mg 叶片使用1 ml Trizol。b、动物组织以鼠肝脏RNA提取为例.取新鲜或-70℃冻存组织,每50-100mg组织加1ml Trizol,用匀浆仪进行匀浆处理.样品体积一般不要超过...