在1983年,美国人Mullis发明了聚合酶链反应技术(polymerase chain reaction, PCR),这一技术将DNA的变性原理以及复性原理加以利用,采用适温延伸、高温变性以及低温复性,让核酸片段实现了体外扩增,可将极微量的目标DNA特异地扩增上百万倍,从而提高对DNA分子的分析和检测,因为PCR有着很高的灵敏度以及特异性,而且简便快速,所...
PCR检测的基本内容样品处理 模板提取 PCR反应液配制 PCR扩增 PCR扩增产物检测 二实验条件:实验要在不同的区域或房间进行一般包括:试剂配制室、样品处理与核酸提取室、PCR扩增室、产物检测室若集中布局:应设置实验样本通道和人员通道 1、设施与设备(1)试剂配制室PCR反应液和缓冲液配制制胶等 主要设备包括:冰箱、低温...
实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time polymerase chain reaction)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。它结合了PCR技术和实时荧光检测技术,能够在PCR反应过程中实时监测DNA的扩增情况,从而实现对...
1. 数字PCR(Digital PCR)简介 数字PCR被称为第三代PCR,是一种高精度的核酸定量检测技术,相比于荧光定量PCR,数字PCR具有不依赖于标准曲线、操作更简单、灵敏度和精度更高(±10% copies/μL)、可实现多重甚至超多重核酸定量、更加适合低丰度目标的检测等优势。
实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)是一项以 PCR 反应为基础的 DNA 定量技术,通过对目标基因在扩增过程中产生的拷贝数进行实时的定量,从而达到对目的基因的定性和定量分析。常用的对 PCR 产物进行荧光定量检测的方法有两种:一种是利用荧光...
随着医疗技术的进步,即时检测(Point-of-Care, POC)诊断正变得越来越重要。其中,聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)技术因其高灵敏度和特异性而在POC诊断中占据了重要地位。本文将基于BCC Research 2024年6月发布的报告《Polymerase Chai...
这一技术为生物医学研究、疾病诊断、食品安全检测等领域提供了重要的工具。二、PCR技术在食品检测领域的应用1.病毒检测:PCR技术广泛应用于病毒检测,如禽流感病毒、SARS冠状病毒等。通过特异性地扩增病毒核酸,PCR技术为快速诊断疾病提供了有力的手段。2.食品新鲜度评估:通过检测食品中微生物的DNA,PCR技术可以评估食品的...
PCR技术于1985年发明,由于该技术对现代分子生物学的建立起到至关重要的作用,发明人穆勒获得了1993年诺贝尔化学奖。由于PCR技术能够在短时间内获得大量DNA片段,灵敏度高、特异性强,因而广泛应用于病原微生物、遗传病相关基因、肿瘤相关基因、优生优育等领域的检测。图1.PCR流程示意图(来源:中国仪器网)1.1.2 ...