②PCR的产物长度可以更为灵活,通常范围在100-1000bp之间。如果需要扩增较长的片段,可以考虑分段扩增后再连接的方法。 2.引物特异性和扩增效率RT-qPCR对引物的特异性和扩增效率要求更为严格。由于RT-qPCR主要用于定量分析,因此需要高灵敏的引物以及确保熔解曲线显示单一扩增产物,特别是在目标基因表达量较低的情况下。