PCR产物克隆测序通过PCR产物直接测序和克隆测序对三种密叶杉属(Athrotaxis)植物rDNA内转录间隔区(ITS)及5.8 S rDNA序列进行了测定与分析.实验表明A. selaginoides rDNA重复序列间的纯合程度很高, 对PCR产物直接测序就可以测定其ITS区序列.而A. laxifolia,A. cupressoides的ITS1重复序列间的纯合程度较低,各重复...
方法改进:我们在特异性引物的5’端加上T载体上通用引物序列(M13R/M13F)进行PCR,然后利用通用引物(M13R/M13F)进行PCR测序(见下图)。 在此我们以扩增狂犬病毒G基因为例说明,以前是直接用特引物测序: 改进前直接用M220/G780和MSL/l1测序,改进后利用通用引物M13R/M13F测序(红色为通用引物) a The positions of prime...
中,一种不依赖于纯化对pcr扩增产物直接进行sanger测序的方法。背景技术::以sanger核酸测序法为代表的一代测序测序技术已广泛应用于临床,在多种疾病的预防、诊断及鉴别诊断、预后预测、用药指导、疗效评价等方面都发挥着重要的作用。此外,一代测序技术还被应用于移植配型、人类白细胞易感性疾病检测、亲子鉴定及产前筛查...
用实时荧光PCR检测YMDD突变;用巢式pcR扩增HBV逆转录酶基因,对PCR产物进行DNA双向测序,NTI软件比对结果.采用Kappa一致性检验对DNA测序法检测的rt204位点突变与实时荧光PCR检测的YMDD突变结果进行比较.结果 PCR产物直接测序法可有效检测低病毒载量标本(500拷贝/ml)和高病毒载量(1010拷贝/ml)标本,同时可以避免高病毒载量...
一种不依赖于纯化对PCR扩增产物直接进行Sanger测序的方法 本发明公开了一种不依赖于纯化对PCR扩增产物直接进行Sanger测序的方法.本发明公开的方法包括:1)利用5'端带有测序引物的引物对对待测DNA片段进行PCR扩增,得到扩增产物;2)在含有测序引物与扩增产物的测序反应体系中进行测序反应,得到测序产物;测序引物的3'端......
本发明涉及一种用于直接测序的低浓度PCR产物浓缩方法.具体为:在待纯化的PCR产物中加入1/10体积pH为5.2的3M醋酸钠和2ul核酸助沉剂(人工合成DNA序列),混匀;加入22.5体积的无水乙醇和300ul的40%PEG8000,20℃放置1030min;4℃12000rpm离心1020min,弃上清;加入1ml70%4摄氏度预冷乙醇,颠倒混匀,4℃12000rpm离心210...
PCR扩增产物检测技术中最直接最有效的是( )A.琼脂糖凝胶电泳B.核酸探针杂交鉴定法C.限制性内切酶法D.PCR扩增产物的直接测序
测序结果可以特异性地反映出序列的真实碱基组成,所以无论进行何种病原微生物快速筛查和鉴定,遗传性疾病的分子诊断和单核苷酸多态性研究,都可以利用本申请所述测序引物.本发明所述用于核酸PCR产物直接测序的测序方法,不需将待测PCR产物插入质粒载体,而直接对PCR产物进行核酸序列测定.具有快速,简便,经济,并能更好地反映...
PCR产物临床应用HBV变异末端标记法核心启动子DNA复制乙型肝炎病毒各个区变异的研究是当前的研究热点.已经知道,HBV有S区,C区,P区和X区四个区.其中X区的变异可影响核心启动子和增强因子Ⅱ,产生翻译终止密码,导致HBV DNA复制和表达的抑制.研究HBV变异的方法有多种,而确定变异位点最直接的方法就是DNA测序.目前,DNA...