TF分子量为48 kDa,Trigger Factor是一种原核的核糖体结合伴侣蛋白质,能够促进新生肽链的共翻译折叠。TF来源于大肠杆菌,与其他生物来源的标签相比,在大肠杆菌中表达效率高,可溶性效果好。 本载体在cspA启动子下游插入了5’非编码区(5’UTR)、TEE(翻译增强元件)序列、His-Tag序列、TF序列和多克隆位点(MCS)。在c...
此外,该载体还包括Lac操纵子,它插入在CSPA启动子下游,以确保严格的表达调控。 二、pCold TF载体的表达机制 pCold TF载体提供冷休克诱导的方法高水平表达目的蛋白,并通过触发因子的表达提高正确的蛋白质折叠,从而实现高效可溶性表达其他系统中难以对付的蛋白。...
为了较好地表达和纯化尿道致病性大肠杆菌F1C菌毛主要亚单位Foc A蛋白,研究以p Cold ~(TM) TF为载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中原核表达F1C菌毛主要亚单位Foc A,验证表达的蛋白是否为可溶性蛋白,并对foc A基因表达的最佳条件进行了优化.结果表明:目的基因foc A在p Cold表达系统中于15℃下诱导24 h蛋白表达量最高,...
目的蛋白分子量是68KD，重组PCold载体在BL21中不表达，说是目的基因里面有很多的稀有密码子，可以通过换...
我利用pcold-TF质粒表达出了重组蛋白，带HIS标签的，并且利用NI柱纯化出了蛋白，但是用HIS单抗做WESTERN...
重组蛋白 多克隆抗体 单克隆抗体 分子生物学/生化试剂 透析袋 微生物菌种 即用型培养基 实验耗材 即用型溶液 生化试剂 探针标记及检测 RNA提取 报告基因相关 核酸纯化 转染相关产品 电泳相关产品 蛋白质相关产品 感受态细胞 克隆相关产品 DNA分子量标准
使用pCold I-IV DNA 表达目的蛋白,出现目的蛋白不表达或者是不可溶性表达时,推荐使用可以表达 可溶性标签的融合载体,pCold TF DNA 或pCold ProS2 DNA。 Q7. 1 L培养基的蛋白质表达量有多少? A7. 根据目的基因的不同,通常能有几mg ～几十mg/L的表达量。进行小规模表达实验时,利用粗提液进行 SDS 电泳,...
产品名称:P0076/pCold TF大肠表达质粒 供应商:上海远慕 启动子: T7/lac 复制子: ColE1 ori,F1 ori 终止子: T7 terminator 质粒分类: 大肠杆菌载体;PET系列表达质粒 质粒大小: 6733bp 质粒标签: N-Nus, N-6×His, N-HRV 3C, C-S, C-Thrombin ...
IPTG诱导后取菌体裂解物进行SDS-PAGE分析,结果表明,经IPTG诱导的重组菌菌体裂解物比未经诱导的明显多出一条分子量约为66 kD的特异条带(标签TF为48 kD,见图4)。超声波裂解菌体,发现蛋白存在于上清当中,即FocA蛋白在pColdTMTF-focA重组质粒中表达后以可溶性融合蛋白的形式存在(见图5)。 外源基因在大肠杆菌中原...