本发明涉及一种pC1300MASCas9基因编辑系统在84K杨树基因编辑中的应用,属于植物基因工程技术领域.包括PagPDS基因靶位点的选择;gRNA的设计;CRISPR/Cas9基因敲除载体的构建;杨树的遗传转化;转基因植株的获得与统计;CRISPR系统对杨树基因的定向编辑.本发明的pC1300MASCas9基因编辑系统在84K杨树基因编辑中的应用简单,快速,...
1.pc1300-mas-cas9基因编辑系统在84k杨树基因编辑中的应用,其步骤如下:步骤(1):pagpds基因靶位点的选择根据84k杨基因序列,找到pagpds基因的cds区并分析结构,查找潜在的cas9靶位点,并根据所需靶位点的位置和gc含量设计grna;步骤(2):grna的设计根据选择的grna模板序列,合成一对序列互补的dna引物,pagpds_f和pagp...
本发明的pC1300‑MAS‑Cas9基因编辑系统在84K杨树基因编辑中的应用简单、快速、高效,运用同尾酶原理构建了多基因编辑的系统,该系统以pC1300‑Cas9和SK‑gRNA为骨架载,理论上,该系统可用于同时编辑无限数量的靶基因。本发明还优化了启动子,用MAS启动子驱动Cas9,并在84K杨中研究其编辑效率。 二、法律状态 ...