载体大小:14758 bp 5' 测序引物及序列:M13 Reverse:CAGGAAACAGCTATGAC 3' 测序引物及序列:M13 (-21) Forward:TGTAAAACGACGGCCAGT 载体标签:-- 载体抗性:Kanamycin.html' target='_blank'>卡那霉素 筛选标记:GUS、Neomycin 备注: 双元植物表达载体,带有Gus报告基因,方便对转染植物进行筛选。
植物双元表达载体 载体大小: 14758bp 原核抗性: 卡那霉素(Kanamycin, Kan) 克隆菌株: Top10、DH5α 报告基因: β-Glucuronidase (GUS) 启动子: CaMV 35S 复制子: oriV 终止子: NOS 表达水平: 高 载体拷贝数: 低 5'测序引物: CaMV35S-f (GACGCACAATCCCACTATCC) ...
摘要对pBI121载体GUS基因后的终止子序列(SacⅠ-EcoRⅠ)通过PCR扩增法进行了酶切位点的添 加,即在SacⅠ后添加了XhoⅠ、在EcoRⅠ前添加了KpnⅠ。序列分析发现,两个酶切位点的添加是成功的, 但扩增的终止子序列与原序列的同源性间有差异,即有4个碱基发生了变异,特别是第17个碱基位点出现 ...
片段及其序列方向; 方格纹矩形框为 GUS 基因; 黑色矩形 框示NOS 终止子. 图1 pBI121 表达载体的构建示意图 Fig. 1 Schematic diagram of const ructing expression vector based on pBI121 plasmid 1. 3 表达载体和转化植株的快速检测 通过常规鉴定方法已知为阳性的pBI121 表达载体和 RNAi 转基因菜心植株作为验...
本实验构建含有CYP2E1基因的植物表达载体:用目的基因替换表达载体pBI121上的Gus基因,构建P35S-CYP2E1-T35S表达盒,即质粒pBI121-CYP2E1。然后通过冻融法将表达... 连桂云 - 青岛科技大学 被引量: 0发表: 2015年 小分子RNA表达载体构建的新方法——MicroRNA前体PCR置换法 利用已知拟南芥miRNA前体为模板,使用替...
GUS)构建植物表达载体,转入农杆菌GV3101(Rif抗性)后挑单克隆,同时利用目的基因引物和NPTⅡ引物菌检...
pBI121表达载体及其转化植株的快速鉴定 王华新,曹家树,向珣,余小林,叶纨芝 (浙江大学蔬菜科学研究所,农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室,浙江杭州310029)摘要:以双元质粒pBI121为基础分别构建正义、反义和RN A干涉(R NA i)植物表达载体.根据pBI121质粒多克隆位点两侧的D NA序列设计1对通用引物,以表达...
【摘要】以双元质粒pBI121为基础分别构建正义、反义和RNA干涉(RNAi)植物表达载体根据pBI121质粒多克隆位点两侧的DNA序列设计1对通用引物,以表达栽体的重组质粒DNA为模板进行PCR扩增,使用限制性内切酶BamH Ⅰ酶切PCR产物以验证扩增条带的真实性,从而可以快速鉴定pBI121表达栽体的重组克隆这种方法也可用于快速鉴定上述表达...
载体为pBI121,目的基因700bp左右(两端分别加有BamHI 和SacI酶切位点,连接在pmd18-simple上),用这...
但是pBI121上并没 Sal I 位点,可以肯定不是原始质粒;由于检测时的引物位点在原质粒GUS两侧,而检测时...