铜绿假.单胞菌噬菌体PaP3生物学特性的研究与噬菌体基因组改造的技术准备,铜绿假.单胞菌噬菌体PaP3生物学特性的研究与噬菌体基因组改造的技术准备,基因组学与应..
进而从PaP3全基因组的256个ORFs中确认该蛋白质的编码基因及其对应的氨基酸序列.结果显示噬菌体PaP3有9种结构蛋白分子,其中57 kD蛋白是由ORF34793编码的.57kD蛋白编码基因全长1542bp,G+C百分含量为49.16%,编码514个氨基酸.该蛋白分子量为57.4kD,等电点为5.879.实验表明该蛋白是一种结构性蛋白,很可能是噬菌体衣壳...
经位于多糖解聚酶目的片段5’端的召日删HI和3’端胁刀dIII双酶切鉴定后,对重组质粒 进行核苷酸测序,结果表明,重组质粒的序列和阅读框均正确。+ 3.铜绿假单胞军菌噬菌体PaP3多糖解聚酶全长基因的表达与纯化:将多糖解聚 酶重组质粒转化大扬埃希菌蹦109,获得了表达稳定的多糖解聚酶基因工程菌。在制 ...
【摘 要】目的:克隆表达铜绿假单胞菌噬菌体PaP3多糖解聚酶基因并检测其活性.方法:应用PCR 技术从铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组中扩增多糖解聚酶基因,将其克隆于原核表达载体pQE 231中,所构建的重组质粒经测序鉴定后转化大肠埃希菌J M109,I PTG 诱导表达;采用N i 2NT A 柱亲和层析分离纯化目的蛋白;提取铜绿假...
在本室已完成全基因组测序和注释的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3[2]中, p02基因的编码产物被推定为多糖解聚酶家簇的成员,但这种推定需要实验的进一步证实.本研究从噬菌体PaP3基因组中扩增多糖解聚酶基因,并在此基础上建立原核表达和纯化的方法,获得了能够特异降解胞外多糖的重组多糖解聚酶,为深入研究PaP3多糖解聚酶基因...
目的 检测铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶大亚单位与噬菌体基因组末端cos位点的结合能力.方法 通过PCR扩增出末端酶大亚单位编码基因tls,经pMD-T18载体克隆至表达载体pQE31上,IPTG诱导表达,获得包涵体蛋白,用包涵体裂解液溶解包涵体,通过Ni-NTA亲和层析,分离出重组目的蛋白rTLS,透析复性后,与生物素标记的基因组末端cos片段...
目的 检索分析铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的遗传密码使用偏嗜性及其tRNA基因的关系。方法 利用生物信息学软件和网上生物信息学工具 ,检索分析PaP3的遗传密码使用偏嗜性 ;并与铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码使用偏嗜性进行对比分析 ;检索PaP3基因组中tRNA基因并分析其与遗传密码使用偏嗜性的关系。结果 遗传密码偏嗜性分析...
Determination of binding ability to specific DNA sequence of putative small subunit of terminase of Pseudomonas aeruginosa bacteriophage PaP3 推定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶小亚单位的DNA结合能力检测 2. The Biological Characters of Pseudomonas Aeruginosa Phage PaP3 and the Identification of Its Integra...
摘要: 目的 检测铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶大亚单位与噬菌体基因组末端cos位点的结合能力.方法 通过PCR扩增出末端酶大亚单位编码基因tls,经pMD-T18载体克隆至表达载体pQE31上,IPTG诱导表达,获得包涵体蛋白,用包涵体裂解液溶解包涵体,通过Ni-NTA亲和层析,分离出重组目的蛋白rTLS,透析复性后,与生... 查看全部>> ...
目的检测理论推定的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶小亚单位(pap3p01基因)编码蛋白对特异性DNA的结合能力。方法通过PCR从噬菌体PaP3基因组扩增出pap3p01基因,克隆至表达载体pQE31,转化入大肠杆菌JM109后,IPTG诱导表达目的蛋白,超声裂菌后发现目的蛋白质H6-PaP3P01存在于上清中,进而利用Ni-NTA亲合层析纯化蛋白。利用...