一方面可以检测到细胞内p62不同形态的含量变化, 另一方面可以观察不同形式 p62 在细胞内的定位。 总体来说, LC3B-II的增加与p62的降低并不具有一致性,要想正确评价自噬流受阻或自噬系统受损应当检测LC3B的转化,也要检测可溶性和不可溶性 p62 的变化。
即使可溶性 p62 蛋白水平降低, 不可溶性 p62 无明显改变, 但 LC3B 没有发生 I 型向 II 型的转化, 也不能说明自噬流一定活化。 获取不可溶性 p62 的方法主要是在常规细胞裂解离心后, 向离心沉淀中加入高浓度尿素或盐酸胍, 使形成包涵体的不可溶性p62溶解, 随后便可使用常规蛋白质电泳进行检测。 需要注意的是,...
若观察到可溶性 p62 蛋白减少, 但不可溶性 p62 明显增加, 则无论 LC3B 是否发生 I 型向II 型的转化均代表了自噬流阻断; 即使可溶性 p62 蛋白水平降低, 不可溶性 p62 无明显改变, 但 LC3B 没有发生 I 型向 II 型的转化, 也不能说明自噬流一定活化。 获取不可溶性 p62 的方法主要是在常规细胞裂解离心后,...
一方面可以检测到细胞内p62不同形态的含量变化, 另一方面可以观察不同形式 p62 在细胞内的定位。 总体来说, LC3B-II的增加与p62的降低并不具有一致性,要想正确评价自噬流受阻或自噬系统受损应当检测LC3B的转化,也要检测可溶性和不可溶性 p62 的变化。