PCR法反转录合成cDNA.特异扩增目的基因片段NICD1,与p3XFLAG?CMV7载体连接后转化大肠杆菌DH5α,LB平板培养基筛选菌落,抽提质粒.并用酶切,测序,转染细胞后检测蛋白表达等方法验证.结果获得重组的p3XFLAG?CMV7?NICD1真核表达载体质粒,经双酶切及测序检测,NICD1基因插入载体部位正确,碱基序列正确.Western blot结果显示...
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p3xFlag-CMV-14表达载体是一个6.3kb的载体,从pCMV5载体衍生而来,用于在哺乳动物细胞内瞬表达或稳表达C末端带有3xFlag标签的融合蛋白。载体多克隆位点下游片段编码了三个相邻Flag抗原表位(Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp)。这使得能够使用Flag M2抗体检测蛋白表达情况。