为了验证重组质粒是否成功表达,需要将hTERT-P2A-EGFP目的片段与原始质粒连接成重组质粒,并将重组质粒导入受体细胞中,观察受体细胞能否合成绿色荧光蛋白。此时对照组的设计应是将不含有hTERT-P2A-EGFP目的片段的质粒(或空质粒)导入受体细胞,观察受体细胞中能否合成绿色荧光蛋白。支持“重组质粒成功表达”的实验结果为:A组...
hTERT(人端粒酶逆转录酶)与细胞的永生化密切相关,在维持端粒长度和细胞增殖能力方面具有重要作用。P2A 序列能够在翻译过程中使前后基因表达的蛋白发生自我剪切,形成独立的蛋白产物。EGFP(增强型绿色荧光蛋白)可作为报告基因,方便观察质粒在细胞中的表达和定位情况。构建 hTERT - P2A - EGFP 基因的真核表达质粒有助于...
方法真核质粒pRRL-hTERT-P2A-EGFP的构建:(1)以pBABE-puro-hTERT和pRRL-EGFP质粒为模板利用PCR技术分别扩增目的基因hTERT、P2A和EGFP,对PCR产物进行胶回收纯化。(2)以凝胶回收的3个目的片段为模板,采用重叠PCR法获得目的片段hTERT-P2A-EGFP。 (3)载体pRRL-与目的片段hTERT-P2A-EGFP酶切处理后进行重组反应。(4)...
pCMV-MCS-P2A-EGFP-HA-Bla是碧云天研发的用于在哺乳动物细胞中同时表达目的蛋白、增强绿色荧光蛋白EGFP和灭瘟素S (Blasticidin S)抗性基因的表达质粒。 本质粒含有的CMV启动子可以高效启动目的基因的表达,同时可以通过P2A共表达增强绿色荧光蛋白EGFP,便于通过EGFP的荧光特性监测目的蛋白的表达情况。本质粒的表达效果可以...
pCMV-MCS-P2A-EGFP-HA-Zeo是碧云天研发的用于在哺乳动物细胞中同时表达目的蛋白、增强绿色荧光蛋白EGFP和博来霉素(Zeocin)抗性基因的表达质粒。 本质粒含有的CMV启动子可以高效启动目的基因的表达,同时可以通过P2A共表达增强绿色荧光蛋白EGFP,便于通过EGFP的荧光特性监测目的蛋白的表达情况。本质粒的表达效果可以参考图1...
方法真核质粒 pRRL-hTERT-P2A-EGF的构建:以 pBABE-puro-hTERT和 pRRL-EGF质粒为模板利用PCF技术分别扩增目的基因 hTERT P2A和 EGFP对 PCF产物进行胶回收纯化。 以凝胶回收的3个目的片段为模板,采用重叠PCR 法获得目的片段hTERT-P2A-EGFP(3)载体pRRL与目的片段hTERT-P2A-EGF酶 2、切处理后进行重组反应。(4) ...
D2814-100μg pCMV-MCS-P2A-EGFP-HA-Bla 100μg 1169.00元 pCMV-MCS-P2A-EGFP-HA-Bla是碧云天研发的用于在哺乳动物细胞中同时表达目的蛋白、增强绿色荧光蛋白EGFP和灭瘟素S (Blasticidin S)抗性基因的表达质粒。 本质粒含有的CMV启动子可以高效启动目的基因的表达,同时可以通过P2A共表达增强绿色荧光蛋白EGFP,便...
pCMV-MCS-P2A-EGFP-Flag-Bla是碧云天研发的用于在哺乳动物细胞中同时表达目的蛋白、增强绿色荧光蛋白EGFP和灭瘟素S (Blasticidin S)抗性基因的表达质粒。 本质粒含有的CMV启动子可以高效启动目的基因的表达,同时可以通过P2A共表达增强绿色荧光蛋白EGFP,便于通过EGFP的荧光特性监测目的蛋白的表达情况。本质粒的表达效果...