因为p65入核发挥作用,还可以分离胞浆、胞核蛋白分别检测p-p65/p65,但是从多数文献看用总蛋白也是没问题的。免疫荧光染色p-p65在核内荧光强度变化。 NF-kB通路常用抑制剂: BAY 11-7082 (MCE)为IκBα 磷酸化和 NF-κB 抑制剂,选择性且不可逆地抑制 TNF-α 诱导的 IκB-α 磷酸化,并减少 NF-κB 和粘附...
p65细胞核易位在调节细胞内促炎反应中起重要作用。根据免疫荧光结果,p65在静态和5% CTS条件下位于细胞质中,但在12% CTS条件下迅速易位到细胞核中(图3 E)。这些数据表明,这两种蛋白质可能参与CTS诱导的AFC炎症反应,其功能可能依赖于p65的细胞核易位。 图3 CTS处理的AFCs中Cav1和整合素β1的表达变化 (A、B)不...
目的:明确P物质和FK-506对人角质形成细胞产生抗菌肽(CAMP)和NF-κB信号活化的影响.方法:P物质单独或联合FK-506处理培养HaCaT细胞24h,用实时荧光定量PCR检测CAMP mRNA表达,免疫蛋白印迹法检测CAMP蛋白表达,免疫荧光染色观察CAMP蛋白原位表达及NF-κB/p65核转位.结果:P物质刺激HaCaT细胞CAMP mRNA及蛋白表达增加,其中1μ...
免疫荧光第一步的步骤几注意事项 1.首先是玻片的处理 洗),晾干备用. 2.不知道你做的细胞是贴壁比较好的细胞比如干细胞 前者的话可以不用多聚赖氨酸包被玻片 片 3.固定,我用的是预冷纯丙酮固定15分钟(应为丙酮有毒,操作的时候小心些 ,所以要多滴加丙酮 ...
本文通过免疫荧光染色方法,发现如果敲低h MOF可以导致A549细胞形态发生改变,细胞由圆形变成梭形,细胞与周围细胞联系不紧密,细胞迁移率增加,促进细胞发生上皮间充质转化(EMT)现象.随后,我们用Western blot和RT-q PCR方法分别检测EMT相关标志物的蛋白水平和m RNA水平,发现敲低h MOF可抑制E-Cadherin的表达,而且促进E-...
本Alexa Fluor 555标记驴抗兔IgG(H+L)用于免疫荧光染色时的推荐稀释比例为1:500。实际实验操作过程中需根据抗原和抗体的具体情况适当调节荧光标记二抗的稀释比例,推荐的调节范围为1:200-1000。本抗体如果用于常规的免疫染色,以每次检测需1毫升1:500稀释的荧光标记二抗计,至少可以检测50次。如果适当重复使用已经使用...
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PhosphoPlus® NF-κB p65/RelA (Ser536) Antibody Duet(1)结合特异性抗原:抗体与其他免疫球蛋白分子区别,就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合,在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。
分两组,第一组癌组织,,例,残端组织,距癌组织边缘,,,以上,,例用,,,酒精固定, ,掇氏度保存进乱二流武细胞学检测。第■组癌组织,,例,残端组织,,例,行,,,福尔马林阃定,石蜡包埋,进行免疫组织化学染色。 ,试剂及仪器, ,, ,免疫组化, 鼠抗人,,,单克隆抗体,,,公司, ,,, ,,,鼠抗人,,, ,单克隆抗...
则不能发挥相应的作用.免疫荧光染色可见 A20 导入后,P50 在细胞浆中的定位发生改变, 证实了NF—KB 信号传导的A20 依赖性阻断反 应.这更充分体现了A20 作为肿瘤抑制因子的 依据_l6].A20 缺失的B 细胞在免疫缺陷小鼠 N0D/SCID/cnuU(NOG)中可稳定形成肿瘤,而 肿瘤的发生,肿瘤细胞增殖和NF.KB 活性可...