本发明公开一种检测NPM1突变分型的方法及其引物和探针,所述引物‑探针组合包括:共用上游引物,序列如SEQIDNO.1所示;A型下游引物,序列如SEQIDNO.2所示;B型下游引物,其序列如SEQIDNO.3所示;D型下游引物,其序列如SEQIDNO.4所示;共用探针,其序列如SEQIDNO.5所示,SEQIDNO.5所示序列的5’端标记有FAM、3’端标记有MGB。本
一种检测NPM1基因突变分型的试剂盒 (57)摘要 本发明涉及一种检测NPM1基因突变分型的 试剂盒，包括RT -PCR反应液、引物探针混合液、RT -PCR反应酶系、DEPC H 2O以及分隔并集中包装 这些试剂瓶或管的包装盒。由于本试剂盒应用一 步法实时荧光PCR反应模式，并对特异性探针进 行LNA修饰，能超敏快速检测急性髓...
摘要 本发明公开一种检测NPM1突变分型的方法及其引物和探针,所述引物‑探针组合包括:共用上游引物,序列如SEQ ID NO.1所示;A型下游引物,序列如SEQ ID NO.2所示;B型下游引物,其序列如SEQ ID NO.3所示;D型下游引物,其序列如SEQ ID NO.4所示;共用探针,其序列如SEQ ID NO.5所示,SEQ ID NO.5所示序列的5...
由于本试剂盒应用一步法实时荧光PCR反应模式,并对特异性探针进行LNA修饰,能超敏快速检测急性髓性白血病患者骨髓及外周血样本中的NPM1基因12外显子突变,最低检出量为0.2ng,同时根据不同通道信号值可对A型、B型、D型突变进行分型,同时加入内标控制系统可检测样本提取效果,可广泛应用于急性髓性白血病化疗效果的预估。
目的:建立一种通过荧光探针熔解曲线分析技术对急性髓系白血病(AML)中NPM1突变基因快速检测和分型的方法.方法:设计Nucleoplasmin(NPM1)第12号外显子突变基因mutA,mutB,mutD和野生型的一对共用引物和一条荧光单链探针(分子信标),依据PCR产物与探针的熔解曲线峰值对A,B,D型基因突变进行检测与分型.结果:本方法可对...
1.本发明涉及基因突变检测技术领域,具体涉及一种检测npm1突变分型的方法及其引物和探针。 背景技术: 2.npm1是一种编码具有伴侣和穿梭功能的多功能核仁蛋白的基因,30%的成人急性髓系白血病(aml)患者携带npm1突变,表现出独特的分子和临床病理特征。npm1基因外显子12的突变是正常核型aml患者中最特异和最常见的遗传病...
本发明的目的在于提供一种利用多重实时荧光聚合酶链式反应技术对npm1基因突变进行分型的高灵敏度试剂盒,利用本试剂盒可以准确检测npm1基因a型、b型、d型突变。 根据genbank中的npm1基因a型、b型、d型突变基因序列,应用primerexpress3.0软件基因突变区设计特异性的引物及探针,并通过ncbi的blast功能对其特异性进行初步鉴定...
5.一种引物探针混合液,其特征在于,所述引物探针混合液由NPM1基因特异性的正、反向引物及特异性的突变分型探针组成,分型探针同时进行了LNA修饰,NPM1基因特异性的正向和反向引物的序列分别是5’-GGTGGTTCTCTTCCCAAAG-3’,5’-CTGTTACAGAAATGAAATAAGACG-3’;突变A型特异性锁核酸探针的序列是5’-CAAGATCTCTGT+CT...
本发明涉及一种检测NPM1基因突变核酸的超敏分型试剂盒,特别是涉及一种利用多重实时荧光聚合酶链式反应技术及锁核酸修饰探针一管反应即可同时检测NPM1基因突变A型、B型、D型的试剂盒。 背景技术 急性髓系白血病(Acute myelogenous leukemia,AML)是起源于造血干/祖细胞的恶性克隆性血液疾病,以骨髓与外周血中原始和幼稚髓...
由于本试剂盒应用一步法实时荧光PCR反应模式，并对特异性探针进行LNA修饰，能超敏快速检测急性髓性白血病患者骨髓及外周血样本中的NPM1基因12外显子突变，最低检出量为0.2ng，同时根据不同通道信号值可对A型、B型、D型突变进行分型，同时加入内标控制系统可检测样本提取效果，可广泛应用于急性髓性白血病化疗效果的预...