1、 破碎组织和灭活RNA酶可以同步进行,可以用盐酸胍、硫氰酸胍、NP-40、SDS、蛋白酶K等破碎组织,加入β-ME可以抑制RNA酶活性。2、 分离RNA一般用酚、氯仿等有机溶剂,加入少量异戊醇,经过此步,离心,RNA一般分布于上层,与蛋白层分开。3、 沉淀RNA一般用乙醇、3M NaAc(pH-5.2)或异丙醇。4、...
裂解液中NP-40的最佳浓度的确定可能需要进行预实验 一个完美的对照需要详细的规划和大量的工作。因此,大多数研究者退而求其次,使用一种不够完美的内标。例如,用cDNA克隆片段按照不同浓度加入到RNA模板中,或者用与靶RNA完全无关的内源RNA样品作为模板,它需要用专门的引物才能进行PCR扩增。如此不完美的对照,对于...
· 核质分离:NP-40用于分离细胞核与细胞质,辅助研究RNA或DNA的亚细胞定位及功能。· 病毒颗粒提取:在病毒学研究中,NP-40用于裂解病毒包膜,释放核酸或病毒蛋白。免疫学与分子检测 · 免疫沉淀与抗体结合:NP-40可增强抗原-抗体结合效率,用于免疫共沉淀(Co-IP)或流式细胞术的样本处理。· Western blot配套...
NP-40会破坏RNA吗 不会。参考资料:RNA提取原理:通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前功尽弃。RNA提取的一般步骤所有
· 核质分离:NP-40用于分离细胞核与细胞质,辅助研究RNA或DNA的亚细胞定位及功能。 · 病毒颗粒提取:在病毒学研究中,NP-40用于裂解病毒包膜,释放核酸或病毒蛋白。 免疫学与分子检测 · 免疫沉淀与抗体结合:NP-40可增强抗原-抗体结合效率,用于免疫共沉淀(Co-IP)或流式细胞术的样本处理。
·核质分离:NP-40用于分离细胞核与细胞质,辅助研究RNA或DNA的亚细胞定位及功能。 ·病毒颗粒提取:在病毒学研究中,NP-40用于裂解病毒包膜,释放核酸或病毒蛋白。 免疫学与分子检测 ·免疫沉淀与抗体结合:NP-40可增强抗原-抗体结合效率,用于免疫共沉淀(Co-IP)或流式细胞术的样本处理。
去除RNA . 1ml . 主要由RNAse A、Tris-HCL、乙酸钠组成,加热灭活。 —20℃,12月 . 抑肽酶储存液(Aprotinin,2mg/ml) . 蛋白酶抑制剂 . 1ml . 工作浓度2ug/ml . —20℃,避光,18个月 . 聚乙烯醇荧光封片剂 . 又称荧光信号增强封片剂或含DABCO 的聚乙烯醇封片剂(防褪色) ,是一种用于减缓荧光淬灭...
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一步法总RNA提取试剂Trizol 培养基类 碳水化合物类 其它生化试剂 染色剂类 维生素类 抗生素类 核酸及其衍生物类 蛋白质类 酶和辅酶类 分离试剂类 生物缓冲液类 Sigma Aldrich 氨基酸类 K1622逆转录酶 国产试剂 Roche Hyclone invitrogen 产品展示Products