3表現質體上而獲得了下列四種質體:pcDNA3/a, pcDNA3/ra, pcDNA3/ac, and pcDNA3/rac,接著利用calcium phosphate沉澱之方法將其轉染至COS7和HEK293細胞中.為了分析內生性CBF1活性之變化,除了表現質體之外,我們將含有CBF-1作用子結合序列之p(FPⅢ)6 CAT報導質體,以及組間對照質體pcDNA3.1/myc-his/LacZ.一起...
作者通过免疫沉淀探究USP7是否与ICN1相互作用。结果发现异位表达的Myc-ICN1与FLAG-USP7相互作用。进一步实验表明USP7与ICN1之间存在直接相互作用。此外，免疫荧光表明USP7和NOTCH1共定位于细胞核。实验表明，USP7通过其N端MATH结构域和C端UBL结构域与ICN1相互作用。其中，UBL结构域足以与ICN1结合，然而USP7的催化...
為了分析內生性CBF1活性之變化，除了表現質體之外，我們將含有CBF-1作用子結合序列之p(FPⅢ)6CAT報導質體，以及組間對照質體pcDNA3.1/myc-his/LacZ.一起協同轉染至細胞中。在本論文中，我們利用anti-myc,anti-His初級抗體及anti-Notch1C-terminal初級抗體以西方點墨法確認轉染至COS7和HEK293細胞中之4種短縮形...
每簇top-100差异蛋白进行ChEA分析(图3d)。Brd4、Myb、Kdm2b在耐药细胞株中上调表达,Notch1在敏感株高表达,而cMyc 和Kdm5b在敏感株中下降,在耐药株中上调。GO富集显示耐药细胞株主要富集于活性氧代谢过程,呼吸链电子传递等,这与上文固有耐...
在 30名克隆性NOTCH1 MUT患者中,25 名患者可获得RNA。采用RT-qPCR 检测25例NOTCH1 MUT和 57例NOTCH1 WT患者的CCND1、CCND2、CCND3 、CCNE1、CCNE2、MYC和细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4、CDK6和CDK2表达水平。采用FITC膜联蛋白...
结果发现异位表达的Myc-ICN1与FLAG-USP7相互作用。进一步实验表明USP7与ICN1之间存在直接相互作用。此外,免疫荧光表明USP7和NOTCH1共定位于细胞核。 实验表明,USP7通过其N端MATH结构域和C端UBL结构域与ICN1相互作用。其中,UBL结构域足以与ICN1结合,然而USP7的催化结构域本身不能与ICN1结合。 图2.USP7与ICN1...
结论Notch1高表达的T-ALL细胞高表达CDK4、CDK6、Myc基因。palbociclib可以使T-ALL细胞的CDK4/6基因表达受到抑制,将细胞增殖阻滞在G1期。由此推测,palbociclib可以部分对抗Notch1基因对T-ALL细胞的促进细胞增殖作用。 关键词: 白血病,T细胞;急性病;细胞增殖;受体,Notch1;Palbociclib ABSTRACT ObjectiveTo investigate the...
值得注意的是,缺少MATH或UBL结构域的USP7突变体无法从ICN1中移除泛素。 作者将HA-泛素和Myc-ICN1质粒共转染293T细胞,结果发现下调USP7后泛素化ICN1的蛋白水平增加。另外,体外去泛素化实验显示,纯化的USP7显著降低了ICN1的泛素化水平。 图3. USP7在体内和体外去泛素化ICN1 研究结论:ICN1是去泛素酶USP7的直接...
研究首先探讨了两组之间的DEG,NOTCH1突变组中有七个DEG上调(图7A,B),这些基因大多与特定的生长刺激因子相关,如MYC、ADM、TGFβ1和TAP1。此外,CD44是一种参与细胞互作、细胞粘附和迁移的细胞表面糖蛋白基因,在NOTCH1突变患者中表达更高。NOTCH1突变患者TNFSF10和PSMB9的表达也更高。这些上调基因有可能成为NOTCH1...
Notch1-cMYC信号通路处于促进细胞增殖和T-ALL生长与发育的中心地带。③可上调CCND3(G1/ S-specific cyclin-D3)和CDK6(cyclin-dependent kinase 6)等与细胞分裂相关蛋白的表达促使T-ALL的生长与发育,促进T前体细胞G1/S的分化;另外Notch1促使S相激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,SKP2)的...