一、 实验原理 继分析DNA的Southern杂交方法出现后,1977年Alwine等人提出一种与此相类似的、用于分析细胞总RNA或含poly A尾的RNA样品中特定mRNA分子大小和丰度的分子杂交技术,这就是与Southern相对应而定名的Northern杂交技术。这一技术自出现以来,已得到广泛应用,成为分析mRNA最为常用的经典方法。 与Southern杂交相似,...
Northern杂交 Northern 杂交（Northern blotting）1979年，J.C.Alwine等提出：将电泳凝胶中的RNA转移到叠氮化的或其他化学修饰的活性滤纸上，通过共价交联作用使它们结合，因其方法同Southern杂交十分相似，故称之为Northern杂交。1 原理 Northern杂交是利用DNA可以与RNA进行分子杂交来检测特异性RNA的技术，首先将RNA混合物...
继分析DNA的Southern杂交方法出现后,1977年Alwine等人提出一种与此相类似的、用于分析细胞总RNA或含poly A尾的RNA样品中特定mRNA分子大小和丰度的分子杂交技术,这就是与Southern相对应而定名的Northern杂交技术。这一技术自出现以来,已得到广泛应用,成为分析mRNA最为常用的经典方法。 与Southern杂交相似,Northern杂交也采...
Northern杂交用于检测特定RNA分子。其基本流程为:1.提取样本RNA并通过变性电泳(常用甲醛胶)分离不同大小的RNA片段;2.将RNA转移到固相膜(如尼龙膜);3.紫外交联固定RNA;4.用封闭剂(如Denhardt液)预杂交封闭非特异性位点;5.用同位素/非同位素标记的探针与目标RNA杂交;6.洗去未结合的探针后通过放射自显影或化学显影...
检测特定 DNA分子的含量[1][2] Northern 印迹杂交(Northern blot )。这 是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法 Western杂交是 将蛋白质电泳、印迹、免疫测定融为一体的特异性蛋白质的检测方法。 其原理是: 生物中含有一定量的目的蛋白。反馈...
Northern杂交(Northern blot),这项由斯坦福大学的James Alwine、David Kemp和George Stark于1977年共同发明的技术,是用于研究基因表达水平的强大工具。🔬🌱 实验步骤概览: RNA提取:从细胞或组织中提取总RNA,或通过寡聚(dT)纯化柱分离纯化得到mRNA。 电泳分离:RNA样本通过电泳依据分子量大小进行分离。常用的电泳胶是...
1. Northern杂交：主要用于检测RNA的表达。通过将RNA从组织或细胞中分离后转移到膜上，然后使用标记的DNA或RNA探针进行杂交，来检测特定RNA分子的存在。主要用于基因表达的时空分析，例如研究某个基因在不同组织或发育阶段的表达情况。2. Southern杂交：主要用于检测DNA。通过对DNA进行切割并转移到膜上，再...
Southern杂交和Northern杂交的区别主要体现在以下几个方面: 检测目标物质不同: Southern杂交主要用于检测DNA,特别是基因组DNA中的特定序列。 Northern杂交则用于检测RNA,特别是细胞总RNA或含poly(A)尾的RNA样品中的特定mRNA分子。 电泳及变性处理差异: Southern杂交通常使用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,...
(1)检测目标物质不同:Southern印迹杂交检测的是DNA,Northern印迹杂交检测是RNA,Western免疫印迹杂交检测的是蛋白质。 (2)所用凝胶不同:Southern印迹杂交和Northern印迹杂交用的是琼脂糖凝胶,而Western免疫印迹用的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶。 (3)是否变性电泳不同:Southern印迹杂交是跑非变性琼脂糖凝胶电泳,电泳之后在凝胶上...
Northern印迹杂交（northernblot）是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转移到硝酸纤维素膜上的技术。这种方法主要用于检测特定mRNA的存在及其表达水平。通过这一技术，研究人员可以识别和量化植物细胞中特定mRNA的含量。在进行northern印迹杂交之前，需要提取植物细胞中的总RNA或mRNA。提取的RNA样本随后通过变性凝胶电泳分离...