1. K562细胞 K562细胞系最初是从患有慢性粒细胞白血病的病人骨髓中分离出来的,也是体外NK细胞细胞毒性试验中的常见靶细胞, 它可以为NK细胞提供与细胞接触相关的扩增刺激。通过转入4-1BBL和膜结合型(mb)细胞因子(IL-15或IL-21),可以极大地增强K562的扩增潜力。mbIL21的滋养层细胞所扩增的NK细胞细胞因子表达量更高...
1.K562饲养层细胞+rhIL-2刺激生长 (1)从外周血液样本中分离出PBMC后,通过免疫磁珠法阴选去除CD3+细胞得到CD3dep细胞; (2)K562经20μg/mL丝裂霉素C(MMC)预处理2 h作为饲养层细胞(具体处理时间可以根据预实验进行确定); (3)调整CD3dep细胞密度...
抽取患者静脉血,离心分离淋巴细胞,分别以50:1 和25:1的比例将NK细胞与靶细胞即K562细胞(一种人类红细胞系)混合共同培养,双标记总K562细胞,碘化丙啶对死亡的K562细胞进行染色。使用流式细胞术检测总K562细胞及死亡的K562细胞数,排除细胞自发死亡的影响,通过计算K562细胞的死亡率来检测...
结论一：自体扩增激活的NK细胞对衰老细胞的清除效果更强 这项研究的自体NK细胞（aNK）来自受试者的外周血，同时研究者比较了外周血单个核细胞（PBMC）和自体NK（aNK）细胞对K562细胞的细胞毒性。结果显示，自体扩增激活的NK细胞相较于其原始来源的PBMC中的NK细胞，在体外展现出了更强的、剂量依赖性的细胞毒性活性，...
1. K562细胞传代培养,取生长旺盛的细胞备用,用NK细胞培养液将细胞密度调为1×105/mL。 2. 培养后的NK细胞调整细胞密度为5×106/mL、2.5×106/mL。 3. 将效靶比=50:1、25:1的NK细胞(效)、 K562细胞(靶)加入96孔圆底板, 实验组分别加入各效靶比的效、靶细胞各50 µL/孔,均设3个复孔。同时设靶细胞...
1. K562细胞：K562细胞是一种人源白血病细胞系，广泛用于NK细胞的扩增和活化。K562细胞具有激活NK细胞的能力，并且易于培养和扩增。2. 重组白细胞介素-2（rIL-2）：IL-2是一种促进NK细胞增殖和活化的细胞因子。通过给NK细胞提供适当浓度的rIL-2，可以促进其生长和增殖。3. 人造抗原呈递细胞（APCs）...
Campana等人的一项研究表明,基因修饰K562细胞,过表达NK刺激分子4-1BB配体和IL-15,并用该细胞刺激NK细胞,在7天的培养期内,NK细胞中位数扩增率为21.6倍,经过3周的培养后,可以获得超过1000倍的NK细胞扩增。使用K562膜结合IL-21和4-1BB配体可以在3周内获得超过30,000倍的NK细胞扩增。这就使得一次外周血采样,就...
K562是一种人类慢性髓系白血病细胞系,对NK细胞杀伤极其敏感,激活Caspase-3/7可诱导K562细胞凋亡。与IL-2饥饿NK-92细胞相比,添加重组蛋白IL-2,IL-2 mRNA iCD-Lx,IL-2 mRNA iD-LNP均会增强K562癌细胞中Caspase3/7表达,同时,维持CD69、NKG2D或者NKP30、TNF-α水平不会发生下降。总的来说,在NK-92细胞中转染...
结论:NK细胞与K562细胞持续性接触后,双方发生了相互免疫编辑作用;NK细胞 的杀伤活性下降,其分子 机制是细胞表面相应的配受体发生了变化. [关键词]K562细胞;杀伤细胞,天然;NKG2D;MHCI类链相关分子;免疫编辑 [中图分类号]R392.12[文献标识码]A ReciprocalimmunoeditingbetweenNKcellsandK562cells ...
而饲养层细胞扩增法常见的添加物为慢性髓性白血病K562细胞和经刺激的自体PBMC细胞(即外周血单个核细胞)[2]。大量高纯度、高活性NK细胞的扩增是其用于治疗的秘密所在。 尤其以PBMC(或以磁珠分离的NK细胞)为原材料进行扩增时,通过特定细胞因子的刺激,使NK细胞在体外得到特异扩增,这种方法是目前被认为比较有应用前景的...