中文名称 GFP 标记的 NK-92MI 稳转株 Lot number NK-92MI-10A1P 细胞规格 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 细胞形态 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 细胞株 构建流程 (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞...
中文名称 ffluc 标记的 NK-92MI 稳转株 Lot number NK-92MI-24D3P 细胞规格 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 细胞形态 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 细胞株 构建流程 (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细...
中文名称 CD16(158F) 过表达 NK-92MI 单克隆株 Lot number NK-92MI-28J2S 细胞规格 复苏细胞 (T12.5细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 细胞形态 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 细胞株 构建流程 (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳...
方法 利用慢病毒感染获得嵌合抗原受体修饰的NK-92细胞(pCAR-92)；使用丫干扰素(IFN -丫)诱导肿瘤细胞过表达PD-L1,通过检 测乳酸脱氢酶(1』H)的释放水平表征pCAR-92细胞对靶细胞A549细胞的细胞毒性，流式细胞术检测pCAR-92细胞中CD107a 以 及IFN-7的水平来反映激活状态，通过IFN-7诱导后的A549细胞NCG 小鼠...
3. SCF基因转染与筛选取对数生长期NK-92细胞，以MOI=20感染慢病毒，同时设置空载体对照组。转染后24小时，更换含2 μg/mL嘌呤霉素（某试剂）的培养基进行筛选，持续7天。采用威尼德紫外交联仪检测转染效率，流式细胞术（某品牌）分析SCF蛋白表达，确认转染成功率＞85%。4. 细胞增殖能力分析采用CCK-8法（某试剂）...
碎片。以MOI0.3转导Jurkat细胞。 [0146]scFab哺乳动物展示系统的功能筛选 [0147]在存在或不存在400U/mL IL‑2的情况下,培养新分离的NK细胞16小时。洗涤scFab 哺乳动物展示文库,并在存在或不存在静息或IL‑2‑刺激的NK细胞的情况下与10μg/mL DNase I一起孵育4小时或24小时。收集存活的细胞并分离基因组DN...
时的病毒复数是6MOI; 优选地,所述第一次病毒感染的持续时间是1‑3小时;最优选地,2小时; 优选地,所述第二次病毒感染的持续时间是3‑5小时;最优选地,4小时。 3.如权利要求1所述的方法,所述目标基因包括嵌合抗原受体。 4.如权利要求1所述的方法,所述NK细胞是由自行制备的人源NK细胞或是商品化的NK 细...
[0048] 在另一优选例中,步骤(S2)中,病毒感染复数(MOI)为1～20,较佳地5 ～15,更佳地 8 ～12,最佳地MOI=10。 [0049] 在另一优选例中,所述的方法制备得到的CAR‑NK细胞的CAR表达率≥50%,优选地 ≥60%,更优选地≥70%。 [0050] 在本发明的第五方面,提供了一种根据如本发明第四方面所述方法制备...
感染时病毒与细胞数量的比值(MOI)为20,转染72小时后,经2.0μg/ml嘌呤霉素筛选,两周流式验证靶点蛋白的表达。 2.1过表达人CD19蛋白的B16细胞可以特异性激活CAR-NK 在NK-92MI细胞上构建如图3中a所示的两种靶向CD19的CAR-NK及相同载体的阴性对照(Mock),为方便后续功能性实验,每种CAR分子均携带绿色荧光蛋白GFP,...
某男,48岁,因口渴多饮,多食,多饮,多尿,腰膝酸软,四肢乏力等不适症状就诊,近2月来体重下降5Kg,相关检查显示随机血糖15moI/L,HAc8.5%,临床诊断为2型糖尿病医师开具格列本脲,执业药师进行用药指导时,建议不要自行同服含有相同西药成分的中成药。下列药物中含有格列本脲的是 A. 十味玉泉胶囊 B. 金芪降糖片 ...