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亲和层析是一种常用的蛋白质纯化方法,其中Ni-NTA柱是一种常见的选择。以下是使用Ni-NTA柱进行亲和层析时需要注意的事项: 无菌操作 🦠 整个操作过程必须严格无菌,避免任何污染。 温度控制 🌡️ 在样品加载和洗涤过程中,保持低温操作,以减少蛋白质的降解。 流速控制 ⚡ 样品加载和洗涤的流速不宜过快,以免影响...
镍离子金属螯合亲和层析介质最经典的配体是IDA。镍离子有六个螯合价数,Ni-IDA螯合了三价,剩余三价;而Ni-NTA螯合四价,剩余两价,因此Ni-IDA琼脂糖凝胶作用力要比Ni-NTA琼脂糖凝胶的强。也正因为这个原因,在同样条件下Ni-IDA洗杂质和目标蛋白的要比Ni-NTA的咪唑浓度高,但是NTA的填料更稳定,耐受更强的还原剂,更...
一、 简介 金属螯合亲和层析介质,又称固定金属离子亲和色谱,其原理是利用蛋白质表面的一些氨基酸,如组氨酸能与多种过渡金属离子如Cu2+,Zn2+,Ni2+,Co2+,Fe3+发生特殊的相互作用,能够吸附富含这类氨基酸的蛋白质,从而达到分离纯化的目的。因此,偶联这些金属离子的琼脂糖凝胶就能够选择性地分离出这些含有多个组氨酸的...
Ni-NTA亲和层析介质(L00250)是把螯合剂(氮川三乙酸或NTA)共价偶联到琼脂糖介质(4%交联)上,然后再螯合Ni2+制备而成。NTA能够通过四个位点牢固的螯合Ni2+从而减少纯化过程中Ni2+泄露到蛋白样品中。金斯瑞亲和层析介质可以纯化任何表达系统(原核,酵母,昆虫细胞和哺乳动物细胞等表达系统)表达的天然或变性的His-标签蛋...
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产品名称:PureCube His Affinity Cartridge (PureCube NTA蛋白纯化预装柱) 产品简介: PureCube His Affinity Agarose (NTA)是针对组氨酸标签的亲和层析产品,组氨酸标签是应用广泛的亲和层析标签,这种标签具有小尺寸、低免疫原性的特点和在多种天然或变性条件下的广泛适用性,以及在有去污剂和其他添加剂的环境中。通过过渡...
Ni柱填料一般有两种,NTA和IDA亲和柱,你这个大小的蛋白1ml填料理想状况可以吸附20mg以上,最多2ml填料不就够了 .这种柱子一般不用大体积,一般装柱都是1-2ml填料,我也用过5-10ml填料的,按比例使用同等条件洗脱效果比小体积的柱子要差很多.纯化是纯度和效率的矛盾,你需要什么样的纯度,需要多大量,我对你的实验并不...
纯泰特殊结构设计的镍离子金属螯合亲和层 析介质包括Ni-NTA和Ni-IDA两种配体,既具有特 异性好、螯合镍更稳定,镍离子脱落少,使用寿命 长的优势,同时具有基础层析介质颗粒粒度均匀, 流速快的优点,并且物理和化学稳定性好,能耐受 更高浓度的还原剂、变性剂和去垢剂,批次重复性 好,质量稳定。本产品已经螯合好镍离子...
Ni柱填料一般有两种,NTA和IDA亲和柱,你这个大小的蛋白1ml填料理想状况可以吸附20mg以上,最多2ml填料不就够了 .这种柱子一般不用大体积,一般装柱都是1-2ml填料,我也用过5-10ml填料的,按比例使用同等条件洗脱效果比小体积的柱子要差很多.纯化是纯度和效率的矛盾,你需要什么样的纯度,需要多大量,我对你的实验并不...