交联的6%琼脂糖凝胶为基质,配体与Ni NTA Beads相同。Ni NTA Beads 6FF除了可以耐受苛刻的试剂条件外,因其耐压的基质,可以耐受高达0.3 MPa的压力,更稳定,因此该产品更适合用于工业大规模蛋白的纯化,可以在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化。 2.纯化流程 2.1 缓冲液的准备 可使用下列推荐缓冲液,也可根据自己...
然后利用谷胱甘肽与谷胱甘肽巯基转移酶(即GST-tag(26 KDa))之间酶和底物的特异性作用力,使得带GST标签的融合蛋白能够与凝胶上的手臂谷胱甘肽结合,从而将带标签的蛋白与其他蛋白分离开。谷胱甘肽通常有氧化型GSSG和还原型GSH,当我们使用GSH洗脱时,GSH会与凝胶上的谷胱甘肽竞争结合融合蛋白,从而将目标蛋白洗脱。GST标签蛋白...
产品信息 >> 蛋白相关 >> 蛋白纯化试剂;Ni NTA Beads说明书下载:Ni琼脂糖凝胶 产品规格:10ml 产品价格:220元 保存条件:20%乙醇中2-8℃保存。 产品简介: Ni NTA Beads是以4%琼脂糖凝胶为基质,通过化学方法偶联了四配位的氮川三乙酸(NTA),螯合镍离子(Ni2+)后,可以形成非常稳定的八面体结构,镍离子处于...
纯化流程 2.1 缓冲液的准备可使用下列推荐缓冲液,也可根据自己的使用习惯配置不同的缓冲液体系,基本原理就是低咪唑上样,高咪唑洗脱,或者高pH上样,低pH洗脱。缓冲液在使用前最好用0.22μm或者0.45μm滤膜过滤除菌。因为Ni NTA Beads可以用于可溶蛋白和包涵体蛋白的纯化,两种方法所需缓冲液不同,具体配置方法见表3...
NiSmart Beads是一种新型IMAC填料,螯合有非常牢固的Ni离子,具体性能见表1。NiSmart Beads主要应用于分泌到真核培养液上清中的组氨酸标记蛋白的捕获和纯化,可以在含有EDTA及DTT的情况下进行目的蛋白高效的纯化。NiSmart Beads有很强的组分兼容性,适用于广泛底物及盐浓度的缓冲条件,试剂耐受情况见表2。
Ni TED Beads 6FF(镍填料),以高流速琼脂糖为基质,以IDA、NTA、TED为配基,并鳌合金属离子Ni2+而形成的一种亲和层析介质,因整合方式不同,Ni2+离子结合力也存在细微差距,在对不同蛋白的纯化过程中表现出不同的选择性,广泛用于His标签蛋白的分离纯化,其中Ni-TED beads 6FF可耐受100mM EDTA和10mM DTT。 详细...
2.3样品纯化 1)将Ni NTA Beads装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的Lysis Buffer(可参考表3和表4的配方)进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。 2) 将样品加到平衡好的Ni NTA Beads中,保证目的蛋白与Ni2+充分接触,提高目的蛋白的回收率。收集流出液,用于SDS-PAGE分析蛋白质的结合...
Ni柱填料一般有两种,NTA和IDA亲和柱,你这个大小的蛋白1ml填料理想状况可以吸附20mg以上,最多2ml填料不就够了 。这种柱子一般不用大体积,一般装柱都是1-2ml填料,我也用过5-10ml填料的,按比例使用同等条件洗脱效果比小体积的柱子要差很多。纯化是纯度和效率的矛盾,你需要什么样的纯度,需要多大量...
2.4.2 重力柱法纯化 1)将装填好的 Ni NTA Beads 6FF 重力柱用5倍柱体积 Lysis Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲液体系下,重复 2-3次。2)将样品加到平衡好的重力柱中,样品保留时间至少2 min,保证样品和介质充分接触,收集流出液,可以反复上样增加结合效率。
WB试剂蛋白纯化IP/CoIP 全部产品列表 产品简介 供货周期现货应用领域食品,化工,生物产业,农业,制药 Ni NTA Beads 6FF(镍填料)属于一类金属螯合介质,以高流速琼脂糖为基质,以次氮基三乙酸(NTA)或亚氨基二乙酸(IDA)为配基,并鳌合金属离子Ni2+而形成的一种亲和层析介质。该亲和介质不仅具有吸附容量大、选择性好、...