NHS-biotin标记抗体的原理如下: 1.首先,将抗体与NHS-biotin反应。在反应中,NHS-biotin中的NHS基团会与抗体上的游离氨基基团反应形成酰亚胺键。 2.这种酰亚胺键是可逆的,并且在酸性条件下会被水解断裂。因此,在反应后需要通过洗涤步骤去除未与抗体结合的NHS-biotin。 3.此步骤的目的是通过结合到抗体上的NHS-biotin...
因此,已经开发出许多生物素化合物作为使用抗体进行免疫测定的标记剂。具有活性酯基的生物素通常用于与蛋白质的氨基(NH2)结合,具有马来酰亚胺基的生物素用于巯基(SH)。 图2.NHS-Biotin与蛋白质氨基结合 蛋白质的生物素标记操作方法 1) 用10mmol/l Bicine Buffer (pH8.5) 溶解蛋白质,制成蛋白质溶液。 2) 在蛋白...
在蛋白或抗体溶液中加入 Sulfo-NHS-LC-Biotin,温和搅拌 30–60 min(4°C 或室温)。 反应后可使用 Sephadex G-25 层析 或 透析 去除未结合的生物素。 3️⃣ 检测标记效率 可通过 HABA 法(4’-hydroxyazobenzene-2-carboxylic acid) 计算 生物素标记度。 使用Western Blot、ELISA 或荧光亲和素结合实验 验...
溶液制备：将Biotin-NHS溶解在适量的水或缓冲溶液中，通常浓度在1-10 mM之间。反应条件：将溶液与目标分子（如蛋白质、抗体或核酸）混合，在适当的pH和温度条件下反应，通常反应时间为30分钟至1小时。纯化：通过适当的方法（如凝胶过滤、透析或亲和纯化）去除未反应的Biotin-NHS，纯化标记后的生物分子。总结来说，Bi...
nhs-biotin-生物素-蛋白抗体标记-BIOFOUNT Biotin-NHS ester试剂反应原理: Biotin-NHS Ester 是一种胺反应性结构单元,用于修饰有机介质中的含胺分子。NHS 活化的生物素是不溶于水的试剂,因此需要溶解有机溶剂,例如 DMSO 或 DMF。短间隔臂为修饰分子增加了质量。
Sulfo-NHS-LC-LC-Biotin 是一种 水溶性、生物素化的交联剂,具有 磺酸基(sulfo)、NHS 酯(N-hydroxysuccinimide ester) 和 双长链间隔臂(LC-LC, Long Chain-Long Chain) 结构。它可用于 生物素标记蛋白、肽、抗体及其他生物分子,并广泛应用于 免疫检测(ELISA)、蛋白质组学、细胞成像及亲和纯化 等领域。产地:...
制备生物素化的牛血清白蛋白的方法如下: 生物素活化:将生物素化合物(如NHS-biotin)在适当的条件下激活,使其具有反应活性。 牛血清白蛋白活化:将BSA在碱性条件下活化,使其表面暴露出足够的反应基团(如氨基或羧基)。 共价结合:将活化的生物素与活化的BSA混合,允许它们在适当的条件下发生共价键结合反应。通常使用交联...
首先，在蛋白质组学研究中，它可以用来标记蛋白质，从而实现对蛋白质的分离和检测。这种标记方法有助于研究人员更好地了解蛋白质的结构和功能，以及它们在生物体内的相互作用。其次，在免疫学研究中，Biotin-SS-NHS ester可以用作抗体的标记，提高检测的灵敏度和特异性。此外，在细胞生物学研究中，它还可以用来研究...
Biotin-LC-LC-NHS 是 SMCC 交联剂，可用于标记抗体和小分子药物，比如紫杉醇。生物素-NHS 酯可以有效地与伯氨基 (-NH2) 反应形成稳定的、不可逆的酰胺键。它的膜渗透性使其可用于细胞内标记。同时该试剂的膜渗透性使其可用于细胞内标记。它可以有效地与伯氨基 (-NH2) 反应，形成稳定的、不可逆的酰胺键。分...
Biotin:一种维生素(B7),具有很强的与亲和素(Avidin)和链霉亲和素(Streptavidin)结合的能力,常用于标记和检测。 NHS(N-羟基琥珀酰亚胺):一种活化基团,能够与伯胺(–NH2)反应,形成稳定的酰胺键。 应用 蛋白质标记:用于将生物素共价连接到蛋白质上,以便于检测、纯化和固定化。 抗体标记:将生物素连接到抗体上,用...