将T/B细胞受体（TCR及BCR）免疫组库二代测序（NGS）技术应用于急性淋巴细胞白血病（ALL）患者的微小残留...
01NGS测序技术概述 定义与特点 定义 NGS（NextGenerationSequencing，下一代测序技术）是一种高通量的测序技术，能够在短时间内快速、高效地测定大量DNA或RNA序列。特点 高通量、快速、准确、低成本、可测序的基因组范围广等。NGS测序技术的历史与发展 2005年 454LifeSciences公司推出基于焦磷酸测序法的测序仪，为第二...
二代测序技术主要有4家公司:罗氏的454技术,illumina的Hiseq和Solexa技术、ABI的Solid技术以及华大的DNB技术,随后会对不同的技术做详细介绍。 二代测序技术的诞生大大提高了测序速度,同时还大幅低降低了成本,并且保持了高准确性。图2是对第一代和第二代测序技术测序成本作了一个简单的比较,由图可知二代测序技术的...
测序技术是基因遗传病诊断应用的主要技术，针对检测基因的范围可大体分为单基因检测技术和多基因检测技术。二代测序技术（主要是高通量测序Next Generation Sequencing，NGS）相较于仅能检测一个或少数几个基因的一代检测技术，可以对基因组的成百上千个基因、甚至人类全部基因进行大规模的平行测序，同时对产生的数十万...
单基因检测技术中应用最广泛的是Sanger测序,也称一代测序。Sanger测序因仅能检测一个或少数几个基因,因此适用于明确可识别的特异性表型的疾病诊断。多基因检测技术主要是NGS测序,也称二代测序。可以对基因组的成百上千个基因、甚至全部人类基因进行大规模的平行测序,同时对产生的数十万至数百万的数据进行同时读取。常...
二代测序是一个强大的功能平台,它可以同时给数以万计的DNA分子进行测序。由于这种可以多个样本同时测序的能力,在个性化医疗、遗传疾病和临床诊断等方面,二代测序也就是高通量测序开创了革命性的领域。 早在1900年代就发明的Sanger测序法,成为了DNA测序的黄金法则,即便到了今天它仍被广泛用来进行常规测序和NGS数据的验...
NGS作为一种检测手段,主要应用于遗传病,主要的技术方案是靶向区域测序、全外显子测序、全基因组测序和线粒体DNA测序。针对某些临床证据或者药物作用靶点/耐药位点的特定热点。另外还有基于胎儿游离DNA的NIPT也是NGS在转化医学中非常经典的应用例子。随着技术的成熟,NGS也开始应用于肿瘤游离DNA的检测,HLA的分型,病原体检...
NGS高通量基因测序技术原理 NGS高通量基因测序技术通过在DNA或RNA序列中逐个测定碱基的顺序,从而获得完整的基因组或转录组信息。它与传统的Sanger测序技术相比,具有高通量、高准确性、高灵敏性和较低成本等优势。其基本原理可以分为样本制备、测序和数据分析三个步骤。 首先,样本制备是整个测序过程中的关键步骤。传统的...
根据不同类型的RNA分子将目标RNA从转录组中提取分离,随后将RNA反转进行文库制备,利用NGS技术进行检测。目前RNA-Seq技术以其低成本高通量宽检测阈值的绝对优势成为转录组研究的主流技术。也将RNA研究推到了前所未有的高度。 相对于传统的表达谱基因芯片技术,高通量RNA测序无须预先针对已知序列设计探针,即可对研究物种的...
相较于传统Sanger测序技术,NGS技术具有更高的通量、更低的成本和更快的速度。 NGS技术的工作流程大致分为以下三个步骤:1)文库制备:通过DNA片段的连接、穿孔和DNA聚合酶链式反应(PCR)扩增等步骤,将样本DNA转化为文库。2)测序:将文库DNA固定在测序芯片上,并利用碱基特异性荧光探针或核苷酸激发释放等技术进行碱基测序...