反应条件:1X T4 DNA连接酶反应缓冲液;在16°C条件下培养。 1X T4 DNA连接酶反应缓冲液:50 mM Tris-HCl、10 mM MgCl2、1 mM ATP、10 mM DTT(pH 7.5 @ 25°C)。 贮存溶液:10 mM Tris-HCl、50 mM KCl、1 mM DTT、0.1 mM EDTA、50% Glycerol(pH 7.4 @ 25°C)。 热失活:65℃10min。 NEB T4...
室温连接反应 为方便起见,连接反应可以在室温(20-25℃)条件下进行。粘性末端连接:在20 μl反应体系中加入1 μl T4 DNA连接酶,反应10分钟。平齐末端连接:在20 μl反应体系中加入1 μl T4 DNA连接酶反应2小时,或者加入1 μl高浓度T4 DNA连接酶反应10分钟。 另外,NEB快速连接试剂盒[NEB #M2200S(30次反应...
好的！谢谢 另外 我看大家都说NEB的内切酶很好用 单酶切反应两个小时足够，可是我反应两个小时没切干净...
NEB的T4 RNA连接酶是用于科研领域的重要工具,它能连接RNA分子,对研究RNA结构和功能至关重要。此产品来自美国,经过严格质量控制,储存于-20℃可保持最佳活性。如需更多详情或想购买替代产品如Salt-T4或Hi-T4 DNA连接酶,请咨询店内。店内产品丰富,专业团队提供售前售后服务,让您科研无忧。如有问题或需求,请随时联系...
连接温度 连接粘性末端(建议用 1X T4 DNA 连接酶缓冲液):在 20 µl 反应体系中加入 1 µl Hi-T4 耐热 DNA 连接酶,在 25-50℃ 条件下温育 10 分钟。连接平末端或单碱基突出末端(建议用 1X StickTogether DNA 连接酶缓冲液):在 20 µl 的反应体系中加入 1 µl Hi-T4 耐热 DNA 连接酶,在 ...
应用:非克隆连接 储存温度:-20℃ 规格:200 units,100 units 热失活:65°C下20分钟 活动二: 分子克隆 & RNA 研究& 蛋白表达及纯化产品 75 折优惠 活动规则:活动期间,购买任意一支活动产品即可享受 75 折优惠 活动产品类别简介 · 分子克隆工具:核酸纯化试剂盒,限制性内切酶,T4 DNA 连接酶 & 试剂盒,Q5®...
T4 DNA 连接酶 t1010-monarch-plasmid-miniprep-kit Monarch® DNA 胶回收试剂盒 Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒(5 μg) 操作说明、说明书 & 用法 使用指南 Tips for Maximizing Ligation Efficiencies 工具& 资源 选择指南 NEB Diluent and Buffer Table ...
ATP 是反应中必不可少的辅因子。这与需要 NAD 作为辅因子的 E. coli DNA 连接酶不同。 若需稀释 T4 DNA 连接酶,推荐使用含 50% 甘油的贮存缓冲液(稀释缓冲液 A,NEB #B8001S)稀释,然后于 -20℃ 贮存。如稀释后立即使用,也可以使用 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液稀释。 连接反应可以在添加 1 mM ATP...
1.DNA片段的磷酸化:将所需的DNA片段与DSDNA磷酸化试剂在适当的温度和时间下进行反应,使DNA片段的末端得到磷酸化处理。 2. DNA连接:将磷酸化的DNA片段与T4 DNA连接酶、ds寡核苷酸适配物1和适配物2在适当的反应条件下进行连接反应。 3.清洁DNA片段:将连接反应产物与DNA清洁柱一起进行纯化,除去杂质和剩余试剂。 4...
目的片段连pET32a,16度过夜,酶连体系为目的片段5μl,载体3μl,T4连接酶1μl,10*Buffer1μl.转化后涂LB-AMP平板,过夜平板长有菌落,但菌落不大,都很孤立,挑取菌落于LB-AMP液体摇菌过夜,试剂盒提取质粒后电泳一片弥散,无目的条带,这是哪个步骤出问题了? 参考见解: 1、 觉得是连接体系可能有问题,目的基因并...