在使用 Sanger 等人提出的双脱氧终止法进行 DNA 测序时,DNA 聚合酶 I,(Klenow)大片段的推荐用量为 1 U/5 μl 反应体积。 补充dNTP 后,DNA 聚合酶 I,(Klenow)大片段在所有四种 NEBuffer 和 T4 DNA 连接酶反应缓冲液中均有活性。 参考文献 Jacobsen, H., Klenow, H. and Overgaard-Hansen, K. (1974)...
Klenow片段是E. coli DNA聚合酶I的缺失5'→3'外切酶N端片段。这个片段具有高度专一的3'→5'线性外切酶活性和5'→3' DNA聚合酶活性,常用于DNA标记、限制性内切酶解析和DNA测序等实验。 总结起来,NEB提供了多种常用酶,这些酶在分子生物学、基因工程和遗传学等领域起到了重要作用。这些酶的广泛应用和高效性使得研...
Klenow 片段(3´→5´ exo–)是 DNA 聚合酶 I 的 N 末端截短物,它保留了 DNA 聚合酶活性,但失去了 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶经突变(D355A,E357A)去除了其 3´→5´ 的核酸外切酶活性(1)。 来源 重组E. coli菌株,其携带的质粒上含有E.colipolA (D355A,E357A)基因的片段,片段起始...
DNA 聚合酶 I,大片段(Klenow 片段)是E. coliDNA 聚合酶 I 的蛋白水解产物,具有 DNA 聚合酶活性和 3´→5´ 核酸外切酶活性,但缺失了 5´→3´ 核酸外切酶活性。Klenow 既保留了全酶的高保真性,又不会降解 DNA 5´ 末端。 来源 重组E. coli菌株,携带有E. colipolA 基因,该基因去除了 5´→...
在使用 Sanger 等人提出的双脱氧终止法进行 DNA 测序时,DNA 聚合酶 I,(Klenow)大片段的推荐用量为 1 U/5 μl 反应体积。 补充dNTP 后,DNA 聚合酶 I,(Klenow)大片段在所有四种 NEBuffer 和 T4 DNA 连接酶反应缓冲液中均有活性。 参考文献 Jacobsen, H., Klenow, H. and Overgaard-Hansen, K. (1974...
Klenow 片段(3´→5´ exo–)是 DNA 聚合酶 I 的 N 末端截短物,它保留了 DNA 聚合酶活性,但失去了 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶经突变(D355A,E357A)去除了其 3´→5´ 的核酸外切酶活性(1)。 来源 重组E. coli菌株,其携带的质粒上含有E.colipolA (D355A,E357A)基因的片段,片段起始...
#NEB 微贴士#用DNA聚合酶I(Klenow)大片段进行末端平齐化后,为什么后续加A尾或连接实验总是不顺利呢?主要的原因有以下几个:1.加入过量的酶进行反应;2.反应温度高于25℃;3.dNTP量不足;4.反应时间过长;这些因素都会导致3’->5’外切酶活性相较于聚合酶活性增强,造成DNA末端碱基被切除形成凹陷。 ...
NEB 提供各种 DNA 聚合酶,并通过不断研究,开发用于 DNA 扩增、qPCR 和 PCR 的高质量创新工具。 Q5®超保真 DNA 聚合酶产品 OneTaq®DNA 聚合酶产品 TaqDNA 聚合酶产品 LongAmp®DNA Polymerases Products Luna® qPCR & RT-qPCR Products 其它PCR 聚合酶产品 ...
Klenow 片段(3´→5´ exo–)是 DNA 聚合酶 I 的 N 末端截短物,它保留了 DNA 聚合酶活性,但失去了 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶经突变(D355A,E357A)去除了其 3´→5´ 的核酸外切酶活性(1)。 来源 重组E. coli菌株,其携带的质粒上含有E.colipolA (D355A,E357A)基因的片段,片段起始...
维百奥生物提供New England BioLabs (NEB)全系列产品:包括限制性内切酶,PCR、qPCR和扩增试剂,DNA修饰酶,NGS和目标浓缩的样品制备,核酸提纯,RNA试剂,DNA组装、克隆和诱变试剂盒,基因组编辑试剂,细胞分析,表观遗传学,蛋白质表达与纯化技术,感受态细胞,蛋白质工具,糖生物学,DNA质粒,缓冲液,菌株。