neb BbsI酶切说明书 NEB内切酶 •从冰箱取出后请一直置于冰上。 •酶最后加入到反应体系中。 •加入酶之前将反应混合物混匀,可以用移液枪上下吹打或轻弹管壁,然后在离心机中快速离心。切忌振荡混匀。 •一般情况下,我们推荐使用5-10单位酶量/μgDNA,基因组DNA用10-20单位酶量消化1小时。 •NEB推出...
片段的连接是通过酶切产生的 4 个碱基突出端互补而形成。酶切后的片段及最终组装产物不再含有 IIS 型限制性内切酶识别位点,所以不可能进一步发生酶切。组装产物随时间逐渐积累。 该方法特别适用于多重组装实验,例如 TALEs(Transcription Activator Like Effectors,转录激活因子样效应物)(5),以及 TALENs(TALE 与 FokI...
大量测试表明,在具有挑战性的 Golden Gate 组装实验(限制性内切酶酶切效率和保真性至关重要)中,相较于 BsaI(NEB #R0535)和 BsaI-HF(NEB #R3535),BsaI-HFv2 的性能更优越。 高保真(HF®)限制性内切酶具有与天然酶相同的特异性,但经过改造后显著降低星号活性,并使用统一的缓冲液(rCutSmart™ 缓冲液)。