2.2.3.3 Western-Blot HA-G 质粒转染293T 细胞 48 h后,于6 孔板中加入细胞裂解液,离心收集上清,随后进行6% Native-PAGE。待电泳结束后,将凝胶铺于硝酸纤维素膜上并置于半干式电转仪中,于 15 V 条件下转膜 18 min。用 PBS 清洗载有蛋白的膜3 次后,将膜放入封闭液中,于 4 ℃封闭 12 h 后,PBST 洗涤...
native-PAGE结束以后,采用电泳的方法进行回收,方法如下: 电泳结束以后,切取部分染色,然后根据染色结果切取含有蛋白质的胶带装入处理过的透析袋中,加入适量的缓冲液,最后把透析袋放入普通的核酸电泳槽中,并在电泳槽中加入适量的缓冲液(和透析袋中的缓冲液相同),低温电泳2-3小时即可。回收蛋白所用的缓冲液一般和电泳...