ND-2000式的核酸浓度测定悖论 众所周知,ND-2000是依据任何物质在紫外可见光范围内的特定波长下可检测到吸光度值,诸如260nm处可检测dsDNA、ssDNA、RNA、dNTPs;280nm处检测蛋白质、乙醇;230nm处检测裂解常见组分硫氰酸胍、盐酸胍、EDTA、Triton™ X-100、Tween®20苯酚等。因此,“pure”dsDNA通过测定得出我们熟知的...
DNARNA浓度测定(Nanodrop仪器检测)DNA/RNA 实验材料: 实验器材:Nanodrop 2000仪器,微量移液器,10微升枪头,擦镜纸 实验试剂:ddH2O 实验步骤: 1.在样本测量臂处于关闭状态,运行NanoDrop软件 2.接着会出现几个连续提示框,选择“是” 3.左边的界面只需勾选Add to report,其它选项一般情况下不用管。右边Sample ID...
1. 双击Nanodrop2000软件图标,选择所需应用(如dsDNA, RNA…),开始测定前应选择“Add to report”以便保存测量数据。 2. 选择样本所溶入的缓冲液为空白液,加1-2微升空白液至检测基座,放下样品臂,按下“Blank”设立空白。建议每30分钟应重新检测一次空白。 3. 抬起样品臂,用干燥无尘擦试纸(或滤纸)清洁检测基座,...
NanoDrop 2000:这款仪器是NanoDrop系列中较为基础的型号,主要用于常规的DNA、RNA、蛋白质等生物分子的浓度测量。它具备精确的超微量测量能力,适用于体积非常小的样品(通常为1-2 µL)。 NanoDrop 2000C:NanoDrop 2000C是NanoDrop 2000的增强版,除了保留NanoDrop 2000的所有基本功能外,还具有更高的功能性和更广泛的...
纯核酸通常产量的1.8〜260/280的比例和DNA和RNA的2.0〜260/280的比例,分别。这个比率是依赖于用于空白和样品测量的缓冲pH值和离子强度。酸性溶液中会根据代表0.2-0.3的比例,而一个基本的解决方案将超过代表比例由0.2-0.3。显着不同纯度率可能表明存在蛋白质,酚或其他污染物,达到或接近280nm处的强烈吸收。二百...
NanoDrop2000超微量分光光度计 一、产品应用 ND-2000是目前国内外实验室中使用最为广泛的一款微量分光光度计,其优越的性能、准确的结果赢得了广大用户的好评。 该产品可用于以下几个方面: *紫外检测: 常规xx波长下检测样品吸光值; *核酸检测: 可检测dsDN A、ssDN A、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280...
Nanodrop的检测原理是紫外吸收,其中Nanodrop 2000这款仪器宣传的检出限是2ng/μl-15000ng/μl(dsDNA),其中当核酸浓度在2~100ng时,SD±2 ng/ul;如果样本浓度高于100ng/μl,CV值为±2% 。另外Nanodrop方法无法区分DNA和RNA,也无法区分单核苷酸和核酸链。所以如果DNA样本中混了RNA或者RNA中混了DNA,核酸短链或核苷...
zRNA:40ng-cm/ul 当选择基座模式,NanoDrop 2000/2000c分光光度计使用1.0mm到0.05mm的短光 程来进行检测,这样保证不用稀释就可以检测高浓度样品。 注意:报告中的吸光值可以象软件屏中显示的模式存档。不论基座检测还是比色 皿检测,核酸检测的吸光值被一致化为1cm光程下的读数值。 NanoDrop 2000/2000c分光光度...
用分光光度计检测核酸的方法已经非常普遍了,包括对DNA和RNA进行定量,甚至评估它们的纯度。检测的方法是,检测260nm的吸收值,再换算成核酸的浓度。其他波长的吸收值,特别是280nm和230nm,可以通过与它们的比值来判断样本的纯度。因为蛋白的*高吸收峰为280nm,所以A260/A280可以评估蛋白在核酸样本中污染的情况:如果A260...
Nano Drop检测样本浓度一般一个样本需要1μl,测得OD260/OD280比值介于1.8-2.1之间,若比值>2.1则RNA样品中可能有基因组污染,若比值<1.8则可能有蛋白质污染;OD230/OD260比值介于0.4-0.5之间,若比值>0.5则可能RNA样品中有盐或小分子杂质污染,比值<0.4可能...