脾脏T细胞的分离和培养就是免疫学领域的一种非常基础和重要实验方法。本文将详细探讨小鼠脾脏T细胞分离培养的关键步骤,帮助大家更有效地进行实验操作。 一、实验目的 提取小鼠脾脏的naive CD4+ T细胞,研究某种因素对naive CD4+ T细胞或某一亚型的CD4+ T细胞增殖分化和功能状态的影响,或者在诱导分化为CD4+ T细胞的某一...
在我进行资料查阅时,发现虽然同为CD4+ T细胞的分化培养,不同出处的实验方案主要有两处不同。首先是抗CD3和抗CD28的添加时间,有的是在磁珠分选前一天提前包被培养板,有些是是临时在细胞悬液中添加;其次是在分化培养的第四天是直接在原孔中补充添加培养基还是弃掉原来的培养基进行更换,不同protocol给出的答案也不...
1ml Naive CD4+T细胞生物素-抗体混合物II,人:CD8、CD14、CD15、CD16、CD19、CD25、CD34、CD36、CD45RO、CD56、CD123、TcRy/8、HLADR和CD235a(糖蛋白A)单抗偶联生物素的混合物。 2ml Naive CD4+T细胞磁珠混合物ⅡI,人:与抗CD61单抗(同型:小鼠IgG1)和抗生物素抗体(同型:小鼠IgG1)偶联的磁珠混合物。
该试剂盒用于从人PBMC中快速、高效分离未经标记的初始CD4 T细胞。通过用生物素化的CD45RO、CD8、CD14、CD15、CD16、CD19、CD25、CD34、CD36、CD56、CD123、抗TCRγ/δ、抗HLA-DR和CD235a抗体孵育PBMC,然后用抗生物素磁珠进行磁标记,从而去除记忆性CD4 T细胞和非CD4T细胞。 优点:...
1.想问下从小鼠分离的naive CD4可以用加了血清和双抗的1640培养吗？2.用磁珠分选后一定要用流式测定...
下面总结了一下 T细胞分析的6种方法：1. 限制稀释培养 该技术涉及通过使用不同稀释度的细胞来测量对...
2.以 200μL抗体/mL细胞的比例将小鼠Naive CD4+ T细胞混合抗体加入细胞悬液中,用移液枪轻柔吹打或涡旋震荡5S,充分混合后室温孵育5min。 3.抗体孵育完成后,以200μL链霉亲和素磁珠/mL细胞的比例将链霉亲和素磁珠加入步骤2的细胞悬液中,用移液枪轻柔吹打或涡旋震荡5S,充分混合后室温孵育2min(注:磁珠使用之前请...
在癌旁正常组织的图谱里面,都是naive的CD4和CD8阳性T细胞。 因为历史遗留原因,T细胞主要是区分成为CD8+ T cell 和 CD4+ T cell 两个大类,也可以是按照功能进行划分,naive, memory ,effector,cytotoxic,Exhaustion。
该试剂盒用于从小鼠脾脏和淋巴结单细胞悬液中分离初始CD4+T细胞。 详细的分离过程 通过去除记忆CD4+T细胞和非CD4+T细胞来分离小鼠初始CD4+T细胞。 小鼠脾脏或淋巴结的单细胞悬液用生物素化的单克隆抗体混合物(主要试剂)标记,而抗生物素的磁珠作为辅助标记试剂间接磁性标记细胞。 同时,将CD44 磁珠添加到标记记忆T细胞...
首先我们来了解一下Th17细胞的分化,与Th1、Th2细胞一样,外周的naive CD4+细胞接受T细胞受体(TCR)抗原刺激和活化抗原提呈细胞分泌的细胞因子,分化为Th17细胞。IL-6或IL-1在TGF-β存在下诱导了STAT3信号和RORγt上调后,Naive CD4+T细胞开始向Th17谱系分化。IL-21以自分泌的方式维持Th17细胞分化,而来自抗原呈递细胞的...