NAD在糖酵解,糖异生,三羧酸循环和呼吸链中发挥着不可替代的作用。中间产物将脱下的氢传递给NAD,使之成为NADH。检测NAD的含量,一般采用竞争抑制酶联免疫(ELISA)法来测定待测样本的含量。这种方法的原理是:将烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗体的微孔中同时加入生物素标记...
NAD(H)的测定 原理 谷氨酸脱氢酶生成的 NAD+在 LDH 催化下转化为 NADH,在第二步反应中形成的丙酮酸的测定可以通过 LDH 反应中添加 NADH。 过量的 NADH 通过碱处理破坏。 材料与仪器 NAD(H) Tris-HCl α-酮戊二酸 ADP 乙酸铵 谷氨酸脱氢酶 D-乳酸脱氢酶 NaOH NADH 磷酸钠缓冲液 荧光光度计 步骤 实验所需...
在动物细胞中,戊糖磷酸途径的氧化阶段是NADPH的最重要来源。NADP/NADPH的定量测定在细胞或组织的能量转化和氧化还原状态的研究中具有重要应用价值。 3.ATP、ADP 三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,简称ATP)为一种辅酶,有改善机体代谢的作用,参与体内脂肪、蛋白质、糖、核酸以及核苷酸的代谢。同时又是体内能量的主要来源...
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。 2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
NAD激酶检测-上海液质 NAD激酶(Nicotinamide Adenine Dinucleotide kinase)是一种重要的酶,参与细胞内能量代谢和信号传导的调控。NAD激酶检测是一种常用的生化检验方法,用于评估细胞能量代谢和相关疾病的诊断。本文将介绍NAD激酶检测的原理、方法和应用。一、原理 NAD激酶检测的原理是通过测定体液中NAD激酶的活性或浓度来...
准确测定NAD+的含量对于研究细胞代谢过程、生物能量产生以及疾病发展等方面具有重要意义。本文介绍了一种用于测定NAD+含量的方法。 方法 1.样品制备 -根据实验需要,选择合适的细胞或组织进行培养或采集。 -使用适当的提取缓冲液将样品细胞或组织充分裂解,以释放内部的NAD+。 -如果需要,使用离心或过滤等方法去除细胞碎片...
m样:样品称样量 图谱 3.2 pH值测定 精密称取50 mg NAD样品于100 mL容量瓶中,用去离子水溶解并定容至刻度,利用pHS-3C型pH计测定pH值(操作见pHS-3C型pH计SOP)。 3.3水分测定 精密称取50 mg NAD样品,放入卡尔费休水分滴定仪中(操作见卡尔费休水分滴定仪SOP),记录结果。 起草人:审核人:批准人:©...
NADP+参与生物合成反应,如脂质和核酸的合成。在动物细胞中,戊糖磷酸途径的氧化阶段是NADPH的最重要来源。NADP/NADPH的定量测定在细胞或组织的能量转化和氧化还原状态的研究中具有重要应用价值。 3.ATP、ADP 三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,简称ATP)为一种辅酶,有改善机体代谢的作用,参与体内脂肪、蛋白质、糖、核酸...
2.测定步骤 ①分光光度计预热30 min以上,调节波长至570 nm,蒸馏水调零。 ②标准稀释液的制备:使用前分别将2 µmol/mL NAD标准液和2 µmol/mL NADH标准液使用蒸馏水稀释至1.25 nmol/mL NAD标准稀释液和1.25 nmol/mL NADH标准稀释液。 序号ABC 稀释前浓度(nmol/mL) 2000 100 5 标准液体积(μL) 50 ...
一、样本测定的准备: 1、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(10 4 个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一),超 声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次...