抗体药物的活性除了由氨基酸序列决定外,翻译后修饰亦对活性有重大影响,在众多的蛋白质翻译后修饰(PTM)中,糖基化修饰是最重要和最复杂的修饰之一,占到所有PTM的50%以上,其糖基化位点、糖型种类及丰度都可能影响产品的有效性、安全性和质量稳定性,因此糖基化被普遍认为是抗体...
内切β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(Endo S2)是一种内切糖苷酶,能够切割N-糖链结构中两个GlcNAc之间的β-1,4糖苷键,同时保留与Asn相连的一个GlcNAc。该酶能够水解存在于Fc N-糖基化位点的所有糖型。此外,Endo S2对所有人类IgG亚类及许多不同物种的IgG均具有活性。该酶可用于降低基于抗体的治疗药物的复杂性,或用于...
与Fc N-聚糖的最内层GlcNAc连接的岩藻糖(“核心”岩藻糖)的缺失增强了与Fcγ的结合RIIIa和ADCC活性,与CHO细胞中大多数岩藻糖基化mAb的活性相反。因此,已开发出糖工程学方法来产生具有增强的ADCC活性的岩藻糖基抗体,包括α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)敲除C...
由于连接的聚糖的复杂性和同量异位性质,糖基化分析十分具有挑战性。随着蛋白质治疗剂在临床实践中的应用不多增多,如单克隆抗体、糖蛋白、激素、细胞因子和凝血因子,蛋白质N-糖基化(也称作N聚糖,N糖)的检测受到越来越广泛的关注。 不同生物内产生的不同类型的N-聚糖 N糖(N-Glycan)是一种含有Man3-GlcNAc2的寡...
FUT8目前唯一已知可以将岩藻糖转移至N-糖链最内部 N-乙酰半乳糖胺(GlcNAc)的1,6位连接，形成-1,6核心岩藻糖基化的转移酶。进一步实验显示敲除 FUT8蛋白表达后，随着B7H3蛋白N-糖链的核心岩藻糖化水平(LcH)下降，B7H3蛋白水平显著下降，且在细胞膜表面的表达显著减少。更为重要的是，在B7H3能发生糖基化修饰...
糖基化作为重要蛋白质修饰,由细胞内多种糖基转移酶的催化介导,对调节蛋白质的结构与功能发挥着至关重要的作用。N-糖基化与代谢异常疾病和癌症的发展、转移有着紧密联系,并影响抗体药物的稳定性、生物活性及免疫反应等。过程工程所化学生物工程前沿交叉研究部高晓冬研究员团队开发了一种对N-糖基化过程中Man5GlcNAc2...
糖基化主要是指将聚糖连接到蛋白质、脂质或其他有机分子上的酶促过程。它是最常见的蛋白质翻译后修饰(PTM)。糖基化分析是具有挑战性的,因为复杂和等压性质的附加聚糖。随着单克隆抗体、糖蛋白、激素、细胞因子和凝血因子等蛋白治疗手段在临床中的应用越来越广泛,对蛋白质n -糖基化的常规监测越来越受欢迎。
利用大肠杆菌表达系统生产糖基化基因工程抗体等重组蛋白及糖疫苗是目前热点研究方向。自2012 年Aebi课题组首次利用大肠杆菌实现类人源化糖链Man3GlcNAc2核心五糖 N-糖基化修饰重组蛋白后,利用多种原核生物进行糖基化修饰的技术一直在不断探索中,其技术核心是将其他原核生物来源的寡糖转移酶(识别并将寡糖转移到重组...
n-糖基化是一种在细胞内广泛存在的后转录修饰过程,通过将N-乙酰葡萄糖胺(N-acetylglucosamine,简称GlcNAc)残基与特定的蛋白质组成部分共价结合来改变其功能。这个修饰过程被广泛地观察到,并且被发现在许多生物学过程中扮演重要角色。 2.2 n-糖基化在泛素化中的作用 n-糖基化在调节泛素连接系统中起着关键作用。泛素...
单克隆抗体Fc 段上通常存在两个N-糖修饰,对单抗的结构和功能具有重要影响。本文对各种糖型与单抗结构和功能的关系以及糖基化分析研究方法进行综述,并讨论了糖型在质量标准建立和提高、工艺变更前后糖型可比性评价和单抗生物类似药糖型的相似性评价中的药学考量。