与Fc N-聚糖的最内层GlcNAc连接的岩藻糖(“核心”岩藻糖)的缺失增强了与Fcγ的结合RIIIa和ADCC活性,与CHO细胞中大多数岩藻糖基化mAb的活性相反。因此,已开发出糖工程学方法来产生具有增强的ADCC活性的岩藻糖基抗体,包括α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)敲除C...
抗体药物的活性除了由氨基酸序列决定外,翻译后修饰亦对活性有重大影响,在众多的蛋白质翻译后修饰(PTM)中,糖基化修饰是最重要和最复杂的修饰之一,占到所有PTM的50%以上,其糖基化位点、糖型种类及丰度都可能影响产品的有效性、安全性和质量稳定性,因此糖基化被普遍认为是抗体...
与Fc N-聚糖的最内层GlcNAc连接的岩藻糖(“核心”岩藻糖)的缺失增强了与Fcγ的结合RIIIa和ADCC活性,与CHO细胞中大多数岩藻糖基化mAb的活性相反。因此,已开发出糖工程学方法来产生具有增强的ADCC活性的岩藻糖基抗体,包括α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)敲除CHO细胞系和岩藻糖基化抑制剂。半乳糖基化还可能...
蛋白翻译后修饰科普专题--走近N-糖基化 1. 糖基化修饰类型 2. N-糖基化修饰简述 3. N-糖链的合成、转移、修饰 4. N-糖基化蛋⽩富集与糖链释放 5. N-糖基化修饰功能简述
对于常规修饰来讲,修饰基团相对固定,比如乙酰化,磷酸化,甲基化等都有固定的分子量偏移或者相对稳定的分子结构,请见如下乙酰化修饰原理图。 图1 乙酰化反应原理 但是糖基化并不如此,同一个位点上可能有几十种糖型,且分子量大小、空间结构等呈现多样性,如图2展示,为同一肽段上的不同糖型(该图片仅供说明该论点,不...
根据连接氨基酸残基不同,糖基化主要分为 N-糖基化(可细分为高甘露糖型、复合型、杂合型)、O-糖基化(研究比较多的是 O-GalNAc、O-GlcNAc)、C-连接糖基化、糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚四大类型。不同的修饰类型功能有所不同,其中研究最多的是 N-糖基化,O-糖基化次之。本文简单介绍一下 N-糖基化修饰。
单克隆抗体Fc 段上通常存在两个N-糖修饰,对单抗的结构和功能具有重要影响。本文对各种糖型与单抗结构和功能的关系以及糖基化分析研究方法进行综述,并讨论了糖型在质量标准建立和提高、工艺变更前后糖型可比性评价和单抗生物类似药糖型的相似性评价中的药学考量。
由于连接的聚糖的复杂性和同量异位性质,糖基化分析十分具有挑战性。随着蛋白质治疗剂在临床实践中的应用不多增多,如单克隆抗体、糖蛋白、激素、细胞因子和凝血因子,蛋白质N-糖基化(也称作N聚糖,N糖)的检测受到越来越广泛的关注。 不同生物内产生的不同类型的N-聚糖 N糖(N-Glycan)是一种含有Man3-GlcNAc2的...
这里先补充一些抗体表达以及糖型的知识,目前工业界到了CMC阶段,抗体主流是构建稳转CHO细胞系来表达,表达的过程中会出现各种修饰,N-297位糖基化修饰为最常见的一种,修饰过程起始于内质网完成于高尔基体,且根据其末端精细结构(长度、分支及单糖排列)的不同又可分为复合型、杂合型和高甘露糖型(下图的complex, hybrid...
由于连接的聚糖的复杂性和同量异位性质,糖基化分析十分具有挑战性。随着蛋白质治疗剂在临床实践中的应用增多,如单克隆抗体、糖蛋白、激素、细胞因子和凝血因子,蛋白质N-糖基化(也称作N聚糖,N糖)的检测受到越来越广泛的关注。 N糖(N-Glycan)是一种含有Man3-GlcNAc2的寡糖结构,它们通过末端N-乙酰基葡糖胺(...