Muts和Mut+菌株在没有甲醇存在的情况下生长速率一样,存在甲醇的情况下,AOX1启动子被强烈诱导,Mut+较Muts生长更快(4-5倍)。 酵母蛋白表达载体 酵母蛋白表达载体的选择 酵母表达产物有胞内表达和分泌到胞外表达两种方式,这取决于表达载体的选择和构建是否带有信号肽,可根据基因表达的定位及目的选择合适的酵母蛋白表达...
如此点约100个转化子,30℃培养2-5天,观察比较MM、MD上相同标号点菌落,MD平板上生长快,MM平板上生长缓慢或不生长点为Muts,生长速度一样点为Mut+。原理是Mut+能够快速利用甲醇为碳源,而Muts则不能利用甲醇为碳源。所以Mut+能够在含甲醇(MM)平板也快速生长,而Muts只能在含葡萄糖(MD)平板快速生长。 wafx9sky2 ...
原理是Mut+能够快速利用甲醇为碳源,而Muts则不能利用甲醇为碳源。所以Mut+能够在含甲醇(MM)平板也快速生长,而Muts只能在含葡萄糖(MD)平板快速生长。
毕赤酵母真核表达型mut+和muts的鉴定 我最近在做毕赤酵母真核表达,按照INVITROGEN表达手册进行,其中在鉴定表达型的时候,文献中说既可以用PCR方法,又可以用MMD和MMH培养基来鉴定,其中用PCR的话会同时出现两条带是快表达型,反之为慢表达型;用培养基鉴定的话在两种培养基中均良好生长,则为快表达型,在MMH培养基中...
在发酵罐水平下,Mut+型菌株各时间段表达产物酶活性明显高于Muts型菌株.Mut+型菌株表达的酶活性在甲醇诱导96h达到最大值,为6424U/mL,比活性为2607U/mg,菌体干重为123.6g/L.Mut型菌株表达的酶活性在诱导后108h达到最大值,为119U/mL,比活性为1867U/mg,菌体干重为113.5g/L.以上结果表明,Mut+型毕赤酵母更有...
Mut+和Muts 在毕赤酵母表达系统中,乙醇氧化酶有两种基因编码,即AOX1和AOX2。细胞中绝大多数乙醇氧化酶活力有AOX1提供,菌株利用甲醇的速度主要由AOX1基因表达的AOX1蛋白提供。当AOX1缺失,只存在AOX2时,大部分的乙醇氧化酶活力丧失,这种细胞利用甲醇能力低,在甲醇培养基上生长缓慢的菌株表现型为Muts。存在AOX1,细...