这种过程又可以分为2种情况讨论:第一,MTT可能在体外也可以被琥珀酸或FADH2还原,但是该过程活化能较大,因而很难发生(即这个反应是热力学有利,但动力学不利的),而在琥珀酸脱氢酶附近,可能酶的一些氨基酸残基可以营造有利于MTT还原的环境(如氨基酸残基的侧链基团稳定反应中间体,琥珀酸脱氢酶附近的pH可以提高反应中间体...
MTT 比色法凭借其操作相对简便、成本较低、重复性好等优势，在细胞活力测定中站稳脚跟，但它也有一定局限性，如对细胞有一定毒性、不适用于悬浮细胞等。科研人员需依据研究需求灵活选用，为细胞相关研究提供精准数据支撑。
四唑盐（MTT）比色法是一种常用于细胞活力检测的经典方法，其检测原理主要基于活细胞线粒体中的酶促反应。以下是该方法的详细原理：一、MTT的化学结构与活性 MTT，全名3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐，是一种黄色的四唑盐。它本身是一个非极性分子，不能直接溶于水，但在不含酚红的培养液或...
MTT比色法是一种常用的细胞活力检测方法，其原理是将MTT（3-(4,5-二甲基-2-噻吩基)-2,5-二苯基...
mtt比色法通过测定细胞增殖或新陈代谢,以测定一种化合物对细胞的毒性、活性、药理作用。其基本原理是,当细胞被外界刺激后,其内的酯酶将酶Mtt(3-甲基-2-甲基哌嗪脱氧核苷)水解为亚甲基橙色绝对酸(Mtt),经酒精溶剂抑制其光致变色,以亚甲基橙色溶液在490nm处吸收率表征当量活性物质含量。 mtt比色法可快速准确测定...
MTT比色法是一种检测细胞存活的方法。其监测原理为活细胞中的一种酶能使外源MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在540 nm波长处测定溶解了甲瓒的DMSO的光吸收值(即OD540值),可间接反映活细胞数量。某高校科研小组采用MTT比...
普通MTT法实验步骤: 1. 接种细胞:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔1000-10000个细胞(细胞浓度的问题见后面的注意事项)接种到96孔板,每孔体积200ul. 2. 培养细胞:同一般培养条件,培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。
🔬 检测原理:MTT比色法是一种常用的细胞活性检测方法。活细胞的线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源性的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲臜,并沉积在细胞中。而死细胞则没有这种能力。二甲基亚砜(DMSO)能够溶解细胞中的甲臜,通过酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,从而间接反映活细胞的数量。在一定细胞数...
四唑盐比色法是一种检测细胞活力的方法,四唑盐是一种能接受氢原子的显色剂,化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,简称为MTT。MTT在不含酚红的培养液或0.01 mol/LPBS中溶解后为黄色,活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT(黄色)还原为难溶性的蓝紫色结晶物——甲臜(formazan),而...
弃去MTT溶液,加入100ul DMSO溶液,摇床上低速振荡10min,使细胞内结晶充分溶解。 酶标仪检测OD490值,细胞存活率=试验组吸光值/对照组吸光值x100%。MTT比色法的OD值不固定,有490nm、570nm等,需根据自己买的MTT试剂说明书进行设置。0 0 发表评论 发表 作者...