一、实验应用 1. 细胞增殖测定 2. 细胞毒性测定 3. 细胞活性测定 (不加样本,没有下述DAY 2步骤2) 4. 药物筛选 5. 肿瘤放射敏感性测定 二、实验原理 噻唑蓝,简称MTT。细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜 (Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜 (...
MTT实验的基本原理是将MTT溶液与脱氧核糖核酸(DNA)和细胞色素c等呈还原态的细胞代谢产物作用,产生紫色的晶体。通过比色法测定反应产物的吸收值,反映出细胞的代谢活力。 MTT实验原理流程 MTT实验的原理流程可以概括为以下几个步骤: 1、细胞培养 将目标细胞培养于带有适宜培养基的正常生长环境下,使其形成单层细胞。 2...
该试剂的工作原理基于细胞的代谢能力,其将细胞内的黄色水溶性四甲基偶氮唑盐(MTT盐)氧化为紫色的可溶性形式,从而通过测量溶解形式的MTT的光密度来反映细胞代谢活性水平。以下将详细介绍MTT原理及实验方法。 MTT试剂的原理: 1.MTT溶解:MTT试剂在组织培养试验中被混合到细胞培养物中。MTT盐会被细胞内的还原酶还原成...
一、实验原理 MTT实验的原理依赖于细胞内琥珀酸脱氢酶的活性。这种酶能催化MTT分子在细胞内的还原过程,形成水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中。活细胞具有此酶的功能,因此能够产生甲瓒结晶,而死细胞缺乏这种功能。二甲基亚砜(DMSO)被用来溶解细胞内的甲瓒结晶。通过酶标仪在490nm或570nm波长处测定甲...
MTT比色实验的原理基于细胞的代谢活性和酶系统的存在。活性细胞内的还原酶能够将黄色的MTT试剂还原为紫色的形式,形成可溶性产物。产生的紫色产物的吸光度与细胞活性或增殖活性成正相关。 3. MTT 3.1 MTT比色实验常用于评估化合物的细胞毒性。通过处理细胞与待测化合物,可以了解化合物对细胞生存率的影响,从而评估其毒...
3.处理药物:根据实验需求,选择适当浓度的药物或化合物,并将其加入每个孔中。 4.处理时间:根据需求和实验目的,将药物处理时间设定为不同的时间段。 5.加入MTT溶液:在处理药物和处理时间后,将MTT溶液加入每个孔中,并使其充分与细胞接触。 6.溶解晶体:处理一段时间后,将培养基和MTT溶液完全吸取,然后添加溶解晶体溶...
MTT溶液进入细胞内后,被细胞内还原酶(如线粒体呼吸链中的NADH和NADPH)还原为可溶的紫色产物,然后用溶剂将细胞中的紫色产物溶解出来,最后通过测量溶液的吸光度来评估细胞代谢活性。MTT实验在细胞生物学和药物筛选中广泛应用,在实验中需要注意以下几点: 1.细胞密度和培养时间:MTT实验中,细胞的初始密度和培养时间是影响...
MTT法原理：活细胞线粒体中的脱氢酶能够还原黄色的溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑[3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyiterazolium bromide,MTT]为篮紫色的不溶于水的甲瓉（formazan）,甲瓉的多少可通过酶标仪测定其在490nm处的OD值而得知。因为甲瓉生成量在通常情况下与活细胞数成正比...