后续研究人员采用 MST 技术验证 PcrIIC1 和 apo-CbCas9 之间的亲和力,首先用 25 nM Red-tris-NTA 标记 CbCas9,随后将分析物 PcrIIC1 进行梯度稀释(0.00305 μM–100 μM),测得 PcrIIC1 与 CbCas9 具有中等的结合亲和力 (Kd=2.56±0.28 μM) (图2a)。 但值得注意的是,当将 CbCas9 与 sgRNA...
是一种定量分析生物分子间相互作用的前沿技术，通过精确检测荧光变化，结合灵敏的热泳动现象，定量分析分子间相互作用。实验时对互作分子中的一个分子进行荧光标记，使之成为非常灵敏的标签分子，在 MST 技术中称之为 Target；与之互作的另一个分子称之为 Ligand。Target 分子与 Ligand 分子结合形成复合物，复合物分子...
1. 技术创新:开发更小型、更高效的加热和冷却元件,以及更精确的温度控制技术,以提高MST设备的性能。 2. 集成化:将MST技术与电子芯片、光学传感器等其他微纳技术集成,以实现更复杂的功能和更高的分析效率。3. 自动化和智能化:开发自动化MST设备,实现样品的自动处理和分析,以及利用机器学习和人工智能技术来提高分析...
微量热泳动（microscale thermophoresis,MST）是一种分析生物分子相互作用的技术。MST技术是一种基于检测在温度梯度中的生物分子电泳迁移率的变化而检测生物分子间结合、解离过程，获取分子间相互作用的模式和动力学常数等方面信息的新技术，是近年来发展的研究生物分子相互作用的强有力工具，已广泛应用于药物筛选、信号转...
MST 技术不需要将分子固定在固相表面，可以在游离状态测定蛋白、核酸、离子、化合物、纳米材料等分子间的亲和力 (Kd)。另外，由于 MST 技术使用毛细管进行实验，样品用量少，能够避免昂贵的样品消耗和繁琐的样品制备过程，因此相较于其它分子间相互作用检测技术，MST 技术能够大大降低样品成本。目前，MST 技术已发表文章...
微量热泳动技术(Microscale Thermophoresis,MST)是一种定量分析生物分子间相互作用的前沿技术,通过精确检测荧光变化,结合灵敏的热泳动现象,定量分析分子间相互作用。实验时对互作分子中的一个分子进行荧光标记,使之成为非常灵敏的标签分子,在MST技术中称之为 Target;与之互作的另一个分子称之为 Ligand。Target 分子与...
MST技术无需将蛋白固定在固相载体上，可以更好的保持蛋白的天然构象，利于进行蛋白分子互作实验。案例一：蛋白质与小分子互作-激动剂及拮抗剂研究 缺氧诱导因子（hypoxia-inducible factors, HIFs）是人体内一类重要的转录因子，可以调节与红细胞生成、血管新生以及无氧代谢相关的一系列基因转录，与癌症和贫血等多种疾病...
MST(MicroScale Thermophoresis)微量热泳动可以定量分析分子间相互作用。实验时对互作分子中的一个分子进行荧光标记,使之成为非常灵敏的标签分子,在 MST 技术中称之为 Target;与之互作的另一个分子称之为 Ligand。Target 分子与 Ligand 分子结合形成复合物,复合物分子的尺寸、水化层和电荷的改变都可以导致复合物分子...
此研究中进行了大量的微量热泳动 (MST)实验,通过微量热泳动 (MST)技术,来验证测定 AARS1 蛋白与肿瘤代谢产物 (乳酸) 的互作,确认 AARS1 与 p53 (蛋白与蛋白)互作的行为, 表征蛋白突变体功能上改变。结合其他生理生化实验完整详细地阐述了关键酶 AARS1 与肿瘤代谢物(乳酸)在肿瘤发生和发展中重要作用,揭示了...
图11. MST技术检测ADAR1-p150与3’-笼式arASO/arASO亲和力 MST技术检测3’-笼式arASO与不配对的腺苷的单链靶RNA(ssRNA)的结合亲和力检测结果表明:3’-笼式arASO在没有光刺激的情况下与ssRNA(A·C错配)的结合亲和力比其阳性对照的结合亲和力低17.4倍,但在给予光照后,其亲和力恢复到与阳性对照组相当的水平(左...