1)MSP原理:MSP是一种简便、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方式。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因组DNA,未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变,然后用3对特异性的引物对所测基因的同一核苷酸序列进行扩增。扩增产物用DNA琼脂糖凝胶电泳,凝胶扫描观察分析结果。 MSP示意图注:①亚硫酸氢钠处理;QPCR...
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We have experimentally validated primer pairs designed by our pipeline and shown a very high success rate of primer pairs: out of 66 BSP primer pairs, 63 were successfully validated without any further optimization step and using the same qPCR conditions. The MSP-HTPrimer pipeline is freely ...
目的 研究人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADMSCs)对小胶质细胞表型极化的影响及机制.方法 取C57/BL6小鼠BV-2小胶质细胞,以hADMSCs+脂多糖(LPS)间接共培养,或以单纯LPS培养.倒置显微镜下观察细胞形态.CCK-8法检测小胶质细胞增殖能力,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测小胶质细胞M1/...
(MSP)法检测CYP1A1,GSTP1和GSTM1启动子区DNA甲基化水平,用实时定量PCR(qPCR)技术检测CYP1A1,GSTP1和GSTM1mRNA表达的改变,数据分析采用SPSS22.0统计软件的单... LIU Ai-xiang,刘爱香,李新,... - 全国环境与职业医学研究生学术研讨会 被引量: 0发表: 2017年 VFM新指标能量损耗及循环评价冠心病左室血流动力...
进一步构建互补载体转化突变体愈伤组织,植株突变表型恢复,确定MSP基因就是Os MADS34.4.MSP基因的表达模式分析通过qPCR检测MSP基因在水稻抽穗期不同部位的表达情况,结果表明其在水稻幼穗,护颖,副护颖及雌蕊中均表达强烈,在分蘖芽和雄蕊中也有一定的表达,而在根,茎,叶,鞘以及其他花器官中表达很弱.5.水稻穗发育和...
检测DNA 甲基化需多个技术环节:制备基因组 DNA 样品;DNA的片段化,再用亚硫酸氢钠处理,使未甲基化 C 转变成 U 而甲基化 C 保持不变; 纯化亚硫酸氢钠处理后的痕量DNA;用qPCR 或二代测序等检测。 MSP-ZEWB 提取基因组DNA 效力与常用硅醇磁珠相当。 MSP-ZEWB 纯化亚硫酸氢钠处理后痕量 DNA 的片段耐受高浓...
紫花苜蓿MsPPR1基因的克隆及抗旱功能分析 王少鹏1**，刘佳1**，洪军2，林积圳2，张义2，史昆1，王赞1* （1.中国农业大学草业科学与技术学院，北京 100193；2.全国畜牧总站，北京 100125）摘要：干旱是影响植物生长发育及产量的重要环境因素，PPR（pentatricopeptide repeats）家族蛋白在植物生长发育 以及胁迫响应等...
The relative mRNA expression level of MiMsp40 was quantified by qPCR in five different M. incognita life stages: eggs, pre-J2s, par-J2s, J3s and females. (D) In situ localization of MiMsp40 mRNA. Digoxigenin-labelled antisense MiMsp40 cDNA probe (dark staining) to transcripts specifically ...
For subsequent qPCR analysis, cells were collected and lysed after 16 h of stimulation. PBMCs intended for intracellular cytokine staining (ICS) analysis were harvested after 48 h of MSP1FL stimulation. Supernatants designated for enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) analysis were collected after...