1、DNA提取:应用基因组DNA提取试剂盒,按试剂盒说明书进行操作,提取基因组DNA,应用紫外分光光度法测定DNA浓度和纯度 ,置于-80℃冰箱保存备用。 2、MS-PCR:采用EZ DNA Methylation Kit(Zymo Research,USA) 对DNA进行亚硫酸钠处理,利用反应柱进行脱硫及净化,纯化后DNA可用于后续PCR反应,针对××基因启动子CPG岛富集...
MSP:设计两对引物,一对针对甲基化DNA(M primer),一对针对非甲基化DNA(U primer)。 PCR扩增 🧬 BSP:进行PCR扩增后,产物直接测序或克隆测序,分析甲基化频率。 MSP:使用M和U引物分别进行PCR,通过琼脂糖凝胶电泳分析扩增片段,判断甲基化状态。 结果分析 📊 BSP:通过测序结果,可以明确每个CpG位点的甲基化状态,提...
甲基化特异性PCR(MSP)检测服务 MSP原理:双链DNA变性解链后,在亚硫酸氢钠作用下发生C→U(T)转化,C若已有甲基化则不会改变;DNA甲基化修饰只发生于CpG岛上,因此在亚硫酸氢钠作用下,CpG岛若无甲基化修饰,则序列中的C完全转化为U,CG→UG,若有甲基化则C不会变为U,针对CpG岛甲基化和非甲基化两种DNA设计甲基...
双链DNA变性解链后,在HSO3-作用下发生C(胞嘧啶)→U(尿嘧啶)转化,C若已有甲基化则无此改变;甲基化修饰只发生于5′→3′方向C-G(鸟嘌呤)相联结构的C上,因此在HSO3-作用后,DNACpG岛若无甲基化,则序列中的改变为C→U,CG→UG,若有甲基化则为C→U,CG→CG,用不同的引物做PCR,即可检测出这种差异,从而确定...
根据甲基化的DNA为模板的PCR扩增甲基化的DNA;根据非甲基化的DNA为模板的PCR扩增非甲基化的DNA。MSP引物设计的原那么:①为了最大限度的区分甲基化与非甲基化,引物的3′端至少包含1个CpG位点,我们可以自己设定CpG的“C〞距3′末端的最远距离。“MethPrimer〞中默认值为3,即是在引物的最后3个碱基中,至少有1个是...
产品名称 基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒 产品规格 20次 有效成分含量 99 检测方法 比色法 样本 组织,细胞,线粒体,细菌等 保质期 6个月 标记物 尿液 储存条件 冷藏或-20℃ 用途范围 仅用于科学实验研究使用 是否进口 否 包装规格 盒装 售价 客服报价为准 产地 上海 运输 快递发货 类型...
甲基化特异性的PCR是一种灵敏度高且操作相对简单的甲基化研究方法。重亚硫酸盐处理DNA后,基因组DNA发生的由甲基化状态决定的序列改变。随后进行引物特异性的PCR。该方法引物设计是关键。MSP中设计两对引物,即一对结合处理后的甲基化DNA链(引物对M),另一对结合处理后的非甲基化DNA链(引物对U)。检测MSP扩增产物,...
1甲基化特异性PCR (MS-PCR) 这种方法经济实惠,无需特殊仪器,目前应用最广。它将DNA先用重亚硫酸盐处理,这样未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶,而甲基化的不变,随后进行引物特异性的PCR。MS-PCR中需要设计2对引物,检测MSP扩增产物,根据处理后甲基化或非甲基化DNA链的...
根据甲基化的DNA为模板的PCR扩增甲基化的DNA;根据非甲基化的DNA为模板的PCR扩增非甲基化的DNA。MSP引物设计的原则:①为了最大限度的区分甲基化与非甲基化,引物的3′端至少包含1个CpG位点,我们可以自己设定CpG的“C”距3′末端的最远距离。“MethPrimer”中默认值为3,即是在引物的最后3个碱基中,至少有1个是CpG...