秀丽隐杆线虫由 3 种修饰组成:(i) 遗传背景缺乏熟练的无义介导衰变 (NMD) 途径,以避免 MS2 标记的转录本降解;(ii)荧光标记的MCP缺乏核定位信号(NLS),以避免mRNA在细胞核中的异常隔离;(iii)维持低水平MCP的启动子较弱。这些调整允许跟踪内源性转录本,并且应该被证明有助于理解RNA调控的动力学。 结果 在内源...
boxB/λN22系统由Daigle和Ellenberg开发,并首先在哺乳动物细胞中应用[14],其主要基于λN22蛋白与15 nt boxB RNA茎环结合进行RNA标记(图3)。RNA结合蛋白和适配体尺寸小是该系统的优势,有利于减少对所标记RNA特性的影响。boxB/λN22系统是仅次于MS2/MCP及PP7/PCP的第三位常用系统,可以提供mRNA及其转运分子在...