反转录形成cDNA时,以mRNA为模板,在多聚A尾上结合12-18个dT的寡聚dT片段,作为合适的起始引物,在逆转录酶作用下合成与mRNA互补的DNA单链,结果产生的cDNA末端有一发夹形环。碱处理后,mRNA链降解,发夹形环成为DNA聚合酶的引物,在DNA聚合酶的作用下合成配对的另一条链,然后单链环由核酸酶切除,形成双链DNA分子。
mRNA反转录形成cDNA的过程是怎样的 相关知识点: 试题来源: 解析 有反转录酶,可以以RNA为模版合成DNA。 这过程需要引物,根据mRNA有3‘polyA尾巴的特点,可以用oligo-dT作为引物,合成cDNA,这样可以自然去除非mRNA的RNA的转录。 也可以用随机引物去合成大量不同的cDNA。 如果要反转录特定的mRNA,就根据它设计特异性引物...
你能推测出由mRNA反转录形成cDNA的过程大致分为哪些步骤吗?查阅相关的书籍,看看书中所述是否与你的想法相似。 答案 【解析】第一步:反转录酶以mRNA为模板合成一条与mRNA互补的DNA单链,形成RNA-DNA杂交分子;第二步,核酸酶使RNA-DNA杂交分子中的RNA链降解,使之变成单链的DNA;第三步,以单链DNA为模板,在DNA聚合...
RNA是反转录的模板。总RNA通常用于RT-(q)PCR等下游应用的cDNA合成,而特定类型的RNA(如信使RNA(mRNA...
反转录是进行基因工程过程中,以RNA为模板提取出DNA遗传信息的过程。反转录酶是以dNTP为底物,以RNA为模板,tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物,在tRNA3末端上,按5一3方向,合成一条与RNA模板互补的DNA单链这条DNA单链叫做互补DNA,它与RNA模板形成RNADNA杂交体。随后又在反转录酶的作用下,水解掉RNA链,再以cDNA为模板...
第一步,反转录酶以mRNA为模板合成一条与mRNA互补的DNA单链,形成RNA一DNA杂交分 子;第二步,核酸酶使RNA一DNA杂交分子中的 RNA链降解,使之变成单链的DNA;第三步,以单链 DNA为模板,在DNA聚合酶的作用下合成另一条互 补的DNA链,形成双链DNA分子。 结果...
cDNA文库的构建:将来自真核生物的mRNA体外反转录成cDNA,与载体连接并转化大肠杆菌的过程。⑴细胞总RXA的提取和mRXA的分离⑵第一琏合成:由mRXA到cDNA的
以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。 [详解] mRNA是由基因中的外显子转录形成的,因此cDNA文库中的基因不包含启动子和内含子等结构,与...
1下列有关由mRNA反转录形成cDNA的过程中,所需要的酶是() A. 逆转录酶、RNA聚合酶、DNA聚合酶 B. 逆转录酶、核酸酶、DNA聚合酶 C. RNA聚合酶、核酸酶、DNA聚合酶 D. 逆转录酶、核酸酶、RNA聚合酶 2【题文】下列有关由mRNA反转录形成cDNA的过程中,所需要的酶是( ) A. 逆转录酶、RNA聚合酶、DNA聚合...
mRNA反转录形成cDNA mRNA反转录形成cDNA 相关知识点: 试题来源: 解析 [教材拾遗·拓展]1。第一步,mRNA在反转录酶的作用下形成 RNA-DNA杂交分子;第二步,在核酸酶的作用下将RNA-DNA 杂交分子中的RNA水解掉,形成单链DNA;第三步,以单链DNA为 模板,在DNA聚合酶的作用下形成双链 _ 。