明捷医药已建立mRNA加帽率检测的完整能力,包括起始的探针设计、样品前处理、LC-MS检测、数据分析和方法验证等,检测流程见图2。案例分析 1.优化实验过程提高切割位点的特异性 基于RNase H切割得到的5'末端序列,是当前工艺中常用的加帽率检测法,也是美国药典(USP)推荐的加帽率检测方法。但有报道显示,RNase H切...
mRNA加帽率检测是mRNA质量控制的重要指标。 图1. 真核生物5’-Cap帽结构甲基化修饰情况[1] 在真核细胞中,mRNA的加帽反应主要包括4步[2]:1)RNA三磷酸腺苷酶催化新生mRNA 5’-三磷酸水解为5’-二磷酸结构;2)鸟苷酰转移酶将GMP转移到5‘-二磷酸结构中;3)RNA甲...
一:在细胞中招募蛋白翻译机器,使得mRNA翻译表达出特定生物学功能的蛋白质。 二:提升mRNA稳定性,避免被细胞内的核酸内切酶降解。 可以保持mRNA在翻译、拼接、聚腺苷酸化以及从细胞核导出等各环节中稳定性,并赋予体外转录mRNA对5'到3'外切核酸酶的抗性,从而延长mRNA的半衰期,因此检测mRNA的加帽效率毫无疑问是mRNA生产工...