1、自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3 )使用指南背景:自噬是细胞内的一种“自食(Self-eating ) ”的现象,凋亡是“自杀(Self-killing ) ”的现象,二者共用相同的刺激因素和调节蛋白, 但是诱发阈值和门槛不同,如何转换和协调目前还不清楚.自噬是指 膜(目前来源还有争议,大部分表现为双层膜,有时多层或单层)包 裹...
自噬双标腺病毒（mRFP-GFP-LC3）使用指南 背景：自噬是细胞内的一种“自食（Self-eating）”的现象，凋亡是“自杀（Self-killing）”的现象，二者共用相同的刺激因素和调节蛋白，但是诱发阈值和门槛不同，如何转换和协调目前还不清楚. 自噬是指膜（目前来源还有争议，大部分表现为双层膜，有时多层或单层）包 裹部分...
的mRFP-GFP-LC腺病毒,mRFP用于标记及追踪LC3, GF啲减弱可指 示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GF荧光蛋白对 酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP荧光发生淬灭,此时只能检 测到红色荧光。这种串联的荧光蛋白表达载体系统直观清晰的指示了 细胞自噬流的水平, 是我们自噬研究尤其是自噬流研究不可或缺的...
方法:采用不同浓度雷帕 霉素(50 、100、200、500 、1 000 nmoWL )处理人胚肾细胞( HEK293) ,蛋白印迹法检测不同浓度雷帕霉素组 中自噬 标记蛋白( LC3 蛋白) 的表达及 LC3-I~ LC3一I 比值 ;单荧光 GFP-LC3 质粒和双荧光 mRFP—eGFP—LC3 质粒转染 HEK293细胞 ,雷帕霉素(200 nmo~ L ) 处理3 h,...
目的:探讨双荧光mRFP-eGFP-LC3(ptfLC3)体系在细胞自噬中的作用.方法:采用不同浓度雷帕霉素(50,100,200,500,1 000 nmol/L)处理人胚肾细胞(HEK293),蛋白印迹法检测不同浓度雷帕霉素组中自噬标记蛋白(LC3蛋白)的表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值;单荧光GFP-LC3质粒和双荧光mRFP-eGFP-LC3质粒转染HEK293细胞,雷帕霉素...